中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
6期
1147-1152
,共6页
胡波%陈忠城%王东宁%李林
鬍波%陳忠城%王東寧%李林
호파%진충성%왕동저%리림
鼻咽肿瘤%EB病毒衣壳抗原%原核表达
鼻嚥腫瘤%EB病毒衣殼抗原%原覈錶達
비인종류%EB병독의각항원%원핵표체
Nasopharyngeal neoplasms%Epstein-Barr viral capsid antigen%Prokaryotic expression
目的:构建表达EB病毒衣壳抗原BFRF3基因的原核细胞表达载体并探讨其在鼻咽癌血清学诊断中的应用.方法:以EB病毒DNA为模版,采用PCR法扩增目的基因BFRF3,与原核表达载体PGEX-5X-1连接,构建PC-EX-5X-BFRF3重组质粒,转化大肠杆菌BL21 (DE3),IPTG诱导表达GST/BFRF3融合蛋白.表达产物经SDS-PAGE和免疫印迹法鉴定后,纯化目的蛋白作为包被抗原,制备ELISA试剂检测鼻咽癌患者和正常人群BFRF3-IgA抗体.结果:在大肠杆菌中成功地表达了GST/BFRF3融合蛋白,相对分子质量为44 kD,免疫印迹证实目的蛋白带有免疫原性,目的蛋白经纯化后作为包被抗原检测鼻咽癌患者的灵敏度和特异度分别为65％和87％.结论:采用原核表达系统成功构建并表达了GST/BFRF3融合蛋白,其在鼻咽癌血清筛选中具有诊断价值.
目的:構建錶達EB病毒衣殼抗原BFRF3基因的原覈細胞錶達載體併探討其在鼻嚥癌血清學診斷中的應用.方法:以EB病毒DNA為模版,採用PCR法擴增目的基因BFRF3,與原覈錶達載體PGEX-5X-1連接,構建PC-EX-5X-BFRF3重組質粒,轉化大腸桿菌BL21 (DE3),IPTG誘導錶達GST/BFRF3融閤蛋白.錶達產物經SDS-PAGE和免疫印跡法鑒定後,純化目的蛋白作為包被抗原,製備ELISA試劑檢測鼻嚥癌患者和正常人群BFRF3-IgA抗體.結果:在大腸桿菌中成功地錶達瞭GST/BFRF3融閤蛋白,相對分子質量為44 kD,免疫印跡證實目的蛋白帶有免疫原性,目的蛋白經純化後作為包被抗原檢測鼻嚥癌患者的靈敏度和特異度分彆為65％和87％.結論:採用原覈錶達繫統成功構建併錶達瞭GST/BFRF3融閤蛋白,其在鼻嚥癌血清篩選中具有診斷價值.
목적:구건표체EB병독의각항원BFRF3기인적원핵세포표체재체병탐토기재비인암혈청학진단중적응용.방법:이EB병독DNA위모판,채용PCR법확증목적기인BFRF3,여원핵표체재체PGEX-5X-1련접,구건PC-EX-5X-BFRF3중조질립,전화대장간균BL21 (DE3),IPTG유도표체GST/BFRF3융합단백.표체산물경SDS-PAGE화면역인적법감정후,순화목적단백작위포피항원,제비ELISA시제검측비인암환자화정상인군BFRF3-IgA항체.결과:재대장간균중성공지표체료GST/BFRF3융합단백,상대분자질량위44 kD,면역인적증실목적단백대유면역원성,목적단백경순화후작위포피항원검측비인암환자적령민도화특이도분별위65％화87％.결론:채용원핵표체계통성공구건병표체료GST/BFRF3융합단백,기재비인암혈청사선중구유진단개치.
