CAJ | 학술논문

目的:探讨环境内分泌干扰物双酚A(BPA)对小鼠甲状腺原代培养细胞增殖和凋亡的影响.方法:取雌性BALB/c nu/nu小鼠甲状腺组织,采用胶原酶I/中性蛋白酶联合消化并进行滤泡上皮细胞培养,Westernblotting检测甲状腺球蛋白表达对细胞进行鉴定.采用不同浓度的BPA干预稳定培养48 h的小鼠甲状腺原代培养的滤泡上皮细胞,作用24h后,光学显微镜观测干预前后细胞生长状态的变化,流式细胞术分析细胞增殖和凋亡,real-time PCR法和免疫细胞化学染色法测定干预前后肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(TRAIL-R1) mRNA和蛋白的表达变化.结果:原代培养的小鼠甲状腺滤泡上皮细胞随BPA刺激浓度的增加,生长状态呈现先促进后抑制的趋势；0.01～0.1 μmoL/L BPA作用24 h后,细胞增殖呈剂量依赖性增长,0.1μmol/L BPA可显著刺激细胞增殖(P＜0.05),而1 μmol/L BPA刺激后则表现为细胞增殖水平显著下降(P ＜0.05)；0.1 μ,mol/L BPA刺激后凋亡指数减低(P＜0.05)；0.1 μ,mol/L和l μmol/L BPA刺激后TRAIL-R1 mRNA表达均显著下调(均P＜0.05),蛋白表达与mRNA表达结果趋势一致.结论:低、中浓度BPA可刺激原代培养的小鼠甲状腺滤泡上皮细胞增殖并抑制细胞凋亡,而高浓度BPA对细胞主要表现为毒性损害作用.BPA对细胞凋亡的影响可能与TRAIL-R1相关途径有关.
목적:탐토배경내분비간우물쌍분A(BPA)대소서갑상선원대배양세포증식화조망적영향.방법:취자성BALB/c nu/nu소서갑상선조직,채용효원매I/중성단백매연합소화병진행려포상피세포배양,Westernblotting검측갑상선구단백표체대세포진행감정.채용불동농도적BPA간예은정배양48 h적소서갑상선원대배양적려포상피세포,작용24h후,광학현미경관측간예전후세포생장상태적변화,류식세포술분석세포증식화조망,real-time PCR법화면역세포화학염색법측정간예전후종류배사인자상관조망유도배체수체1(TRAIL-R1) mRNA화단백적표체변화.결과:원대배양적소서갑상선려포상피세포수BPA자격농도적증가,생장상태정현선촉진후억제적추세；0.01～0.1 μmoL/L BPA작용24 h후,세포증식정제량의뢰성증장,0.1μmol/L BPA가현저자격세포증식(P＜0.05),이1 μmol/L BPA자격후칙표현위세포증식수평현저하강(P ＜0.05)；0.1 μ,mol/L BPA자격후조망지수감저(P＜0.05)；0.1 μ,mol/L화l μmol/L BPA자격후TRAIL-R1 mRNA표체균현저하조(균P＜0.05),단백표체여mRNA표체결과추세일치.결론:저、중농도BPA가자격원대배양적소서갑상선려포상피세포증식병억제세포조망,이고농도BPA대세포주요표현위독성손해작용.BPA대세포조망적영향가능여TRAIL-R1상관도경유관.