中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
6期
1070-1075
,共6页
樊启黄%姜枫%胡水旺%唐昭亮%姜勇
樊啟黃%薑楓%鬍水旺%唐昭亮%薑勇
번계황%강풍%호수왕%당소량%강용
核不均一核糖核蛋白K%亚砷酸钠%聚集体%JNK信号通路
覈不均一覈糖覈蛋白K%亞砷痠鈉%聚集體%JNK信號通路
핵불균일핵당핵단백K%아신산납%취집체%JNK신호통로
Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K%Sodium arsenite%Aggregates%JNK signaling pathway
目的:观察核不均一核糖核蛋白(hnRNP)K的表达与定位以及亚砷酸钠(NaAsO2)刺激NIH3T3细胞的反应情况及氧化应激变化,探讨JNK信号通路在hnRNP K蛋白聚集体形成中的作用.方法:构建重组载体pcDNA3-hnRNP K-HA,转染NIH3T3细胞,荧光显微镜观察内源性hnRNP K在细胞中的表达与定位,以及在NaAsO2不同刺激时间该蛋白聚集体的形成情况,并利用活性氧(ROS)检测试剂盒测定胞内ROS水平；给予JNK、MEK、PI3K/Akt、NF-κB和核转运等5种信号通路的抑制剂预处理后,观察聚集体的变化情况.结果:重组质粒构建正确,荧光显微镜观察显示hnRNP K主要定位于胞核中,而重组质粒转染NIH3T3细胞后,可见胞内有蛋白聚集体形成并随NaAsO2刺激时间的延长而递增,且过表达hnRNP K可抑制NaAsO2刺激细胞生成ROS; JNK信号通路抑制剂SP600125明显抑制聚集体的形成.结论:hnRNP K主要定位在NIH3T3细胞的胞核中,胞浆少量分布；NaAsO2可诱导NIH3T3细胞形成hnRNP K蛋白聚集体,此聚集体可抑制胞内ROS生成,且该聚集体的形成有赖于JNK介导的信号通路.
目的:觀察覈不均一覈糖覈蛋白(hnRNP)K的錶達與定位以及亞砷痠鈉(NaAsO2)刺激NIH3T3細胞的反應情況及氧化應激變化,探討JNK信號通路在hnRNP K蛋白聚集體形成中的作用.方法:構建重組載體pcDNA3-hnRNP K-HA,轉染NIH3T3細胞,熒光顯微鏡觀察內源性hnRNP K在細胞中的錶達與定位,以及在NaAsO2不同刺激時間該蛋白聚集體的形成情況,併利用活性氧(ROS)檢測試劑盒測定胞內ROS水平；給予JNK、MEK、PI3K/Akt、NF-κB和覈轉運等5種信號通路的抑製劑預處理後,觀察聚集體的變化情況.結果:重組質粒構建正確,熒光顯微鏡觀察顯示hnRNP K主要定位于胞覈中,而重組質粒轉染NIH3T3細胞後,可見胞內有蛋白聚集體形成併隨NaAsO2刺激時間的延長而遞增,且過錶達hnRNP K可抑製NaAsO2刺激細胞生成ROS; JNK信號通路抑製劑SP600125明顯抑製聚集體的形成.結論:hnRNP K主要定位在NIH3T3細胞的胞覈中,胞漿少量分佈；NaAsO2可誘導NIH3T3細胞形成hnRNP K蛋白聚集體,此聚集體可抑製胞內ROS生成,且該聚集體的形成有賴于JNK介導的信號通路.
목적:관찰핵불균일핵당핵단백(hnRNP)K적표체여정위이급아신산납(NaAsO2)자격NIH3T3세포적반응정황급양화응격변화,탐토JNK신호통로재hnRNP K단백취집체형성중적작용.방법:구건중조재체pcDNA3-hnRNP K-HA,전염NIH3T3세포,형광현미경관찰내원성hnRNP K재세포중적표체여정위,이급재NaAsO2불동자격시간해단백취집체적형성정황,병이용활성양(ROS)검측시제합측정포내ROS수평；급여JNK、MEK、PI3K/Akt、NF-κB화핵전운등5충신호통로적억제제예처리후,관찰취집체적변화정황.결과:중조질립구건정학,형광현미경관찰현시hnRNP K주요정위우포핵중,이중조질립전염NIH3T3세포후,가견포내유단백취집체형성병수NaAsO2자격시간적연장이체증,차과표체hnRNP K가억제NaAsO2자격세포생성ROS; JNK신호통로억제제SP600125명현억제취집체적형성.결론:hnRNP K주요정위재NIH3T3세포적포핵중,포장소량분포；NaAsO2가유도NIH3T3세포형성hnRNP K단백취집체,차취집체가억제포내ROS생성,차해취집체적형성유뢰우JNK개도적신호통로.
