中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
6期
1046-1052
,共7页
于晨辉%杜仲燕%高佳%王伟茜%窦晓兵
于晨輝%杜仲燕%高佳%王偉茜%竇曉兵
우신휘%두중연%고가%왕위천%두효병
酒精性肝病%4-羟基壬烯酸%肿瘤坏死因子α%核因子κB%肝细胞
酒精性肝病%4-羥基壬烯痠%腫瘤壞死因子α%覈因子κB%肝細胞
주정성간병%4-간기임희산%종류배사인자α%핵인자κB%간세포
Alcoholic liver disease%4-Hydroxynonenal%Tumor necrosis factor alpha%Nuclear factor kappa B%Hepatocytes
目的:通过体外细胞及体内动物实验,研究肿瘤坏死因子α(TNF-αt)诱导的4-羟基壬烯酸(4-HNE)致敏肝细胞发生死亡的作用及机制.方法:以人肝细胞株HepG2及小鼠原代肝细胞为细胞模型,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放及MTT比色法检测4-HNE对TNF-α诱导的肝细胞死亡的作用,利用Western blotting技术检测细胞内4-HNE与蛋白质形成的加合物水平,通过Western blotting和ELISA技术检测细胞核内NF-κB(p65)的表达及其与DNA结合活性.以C57BL/6小鼠为动物模型,利用HE染色、ELISA、Western blotting及TUNEL等技术,检测长期摄入酒精前后动物肝组织形态、甘油三酯(TG)水平、4-HNE水平、TNF-α水平及血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性的变化.结果:(1) 4-HNE可以显著增加HepG2细胞及小鼠原代肝细胞对TNF-α杀伤作用的敏感性,从而使TNF-α诱导4-HNE致敏的肝细胞死亡.(2) 4-HNE可显著提高HepG2细胞内4-HNE-蛋白质加合物的水平.(3) 4-HNE抑制HepG2细胞内TNF-α介导的NF-κB活化.(4)长期摄入酒精导致小鼠肝细胞内4-HNE和TNF-α水平升高,引起肝细胞内TG水平升高,血浆ALT活性升高,肝细胞死亡增多.结论:长期摄入酒精使肝细胞发生氧化应激,其产物4-HNE可作为一种肝细胞致敏因子,通过抑制肝细胞内TNF-α介导的NF-κB抗细胞凋亡信号通路,诱导酒精性肝损伤.这可能是一种新的酒精性肝病发病机制.
目的:通過體外細胞及體內動物實驗,研究腫瘤壞死因子α(TNF-αt)誘導的4-羥基壬烯痠(4-HNE)緻敏肝細胞髮生死亡的作用及機製.方法:以人肝細胞株HepG2及小鼠原代肝細胞為細胞模型,通過乳痠脫氫酶(LDH)釋放及MTT比色法檢測4-HNE對TNF-α誘導的肝細胞死亡的作用,利用Western blotting技術檢測細胞內4-HNE與蛋白質形成的加閤物水平,通過Western blotting和ELISA技術檢測細胞覈內NF-κB(p65)的錶達及其與DNA結閤活性.以C57BL/6小鼠為動物模型,利用HE染色、ELISA、Western blotting及TUNEL等技術,檢測長期攝入酒精前後動物肝組織形態、甘油三酯(TG)水平、4-HNE水平、TNF-α水平及血漿丙氨痠氨基轉移酶(ALT)活性的變化.結果:(1) 4-HNE可以顯著增加HepG2細胞及小鼠原代肝細胞對TNF-α殺傷作用的敏感性,從而使TNF-α誘導4-HNE緻敏的肝細胞死亡.(2) 4-HNE可顯著提高HepG2細胞內4-HNE-蛋白質加閤物的水平.(3) 4-HNE抑製HepG2細胞內TNF-α介導的NF-κB活化.(4)長期攝入酒精導緻小鼠肝細胞內4-HNE和TNF-α水平升高,引起肝細胞內TG水平升高,血漿ALT活性升高,肝細胞死亡增多.結論:長期攝入酒精使肝細胞髮生氧化應激,其產物4-HNE可作為一種肝細胞緻敏因子,通過抑製肝細胞內TNF-α介導的NF-κB抗細胞凋亡信號通路,誘導酒精性肝損傷.這可能是一種新的酒精性肝病髮病機製.
목적:통과체외세포급체내동물실험,연구종류배사인자α(TNF-αt)유도적4-간기임희산(4-HNE)치민간세포발생사망적작용급궤제.방법:이인간세포주HepG2급소서원대간세포위세포모형,통과유산탈경매(LDH)석방급MTT비색법검측4-HNE대TNF-α유도적간세포사망적작용,이용Western blotting기술검측세포내4-HNE여단백질형성적가합물수평,통과Western blotting화ELISA기술검측세포핵내NF-κB(p65)적표체급기여DNA결합활성.이C57BL/6소서위동물모형,이용HE염색、ELISA、Western blotting급TUNEL등기술,검측장기섭입주정전후동물간조직형태、감유삼지(TG)수평、4-HNE수평、TNF-α수평급혈장병안산안기전이매(ALT)활성적변화.결과:(1) 4-HNE가이현저증가HepG2세포급소서원대간세포대TNF-α살상작용적민감성,종이사TNF-α유도4-HNE치민적간세포사망.(2) 4-HNE가현저제고HepG2세포내4-HNE-단백질가합물적수평.(3) 4-HNE억제HepG2세포내TNF-α개도적NF-κB활화.(4)장기섭입주정도치소서간세포내4-HNE화TNF-α수평승고,인기간세포내TG수평승고,혈장ALT활성승고,간세포사망증다.결론:장기섭입주정사간세포발생양화응격,기산물4-HNE가작위일충간세포치민인자,통과억제간세포내TNF-α개도적NF-κB항세포조망신호통로,유도주정성간손상.저가능시일충신적주정성간병발병궤제.
