CAJ | 학술논문

目的:采用基因沉默技术抑制小鼠HL-1心肌细胞桥粒斑蛋白(DSP)基因表达以明确DSP与缝隙连接蛋白43(Cx43)的结构和功能关系.方法:用基因沉默技术抑制DSP基因的表达,Western blotting和流式细胞术检测HL-1细胞DSP和Cx43蛋白的表达,用双免疫荧光方法检测DSP与Cx43蛋白的表达与定位情况,并用划痕标记染料示踪技术检测细胞缝隙连接通讯状况.结果:与空白组和对照组相比,siRNA-DSP组的DSP和Cx43蛋白表达量降低(P＜0.05).免疫荧光检测发现空白组和对照组DSP与Cx43蛋白存在共定位情况,而siRNA-DSP组DSP和Cx43蛋白共定位遭到破坏,Cx43蛋白出现再分布,在细胞内检测到Cx43蛋白,并且划痕标记染料示踪技术检测发现siRNA-DSP组Lucifer yellow通过HL-1细胞缝隙连接的传输功能降低.结论:DSP表达抑制不仅使Cx43出现再分布,而且影响缝隙连接传导功能.
목적:채용기인침묵기술억제소서HL-1심기세포교립반단백(DSP)기인표체이명학DSP여봉극련접단백43(Cx43)적결구화공능관계.방법:용기인침묵기술억제DSP기인적표체,Western blotting화류식세포술검측HL-1세포DSP화Cx43단백적표체,용쌍면역형광방법검측DSP여Cx43단백적표체여정위정황,병용화흔표기염료시종기술검측세포봉극련접통신상황.결과:여공백조화대조조상비,siRNA-DSP조적DSP화Cx43단백표체량강저(P＜0.05).면역형광검측발현공백조화대조조DSP여Cx43단백존재공정위정황,이siRNA-DSP조DSP화Cx43단백공정위조도파배,Cx43단백출현재분포,재세포내검측도Cx43단백,병차화흔표기염료시종기술검측발현siRNA-DSP조Lucifer yellow통과HL-1세포봉극련접적전수공능강저.결론:DSP표체억제불부사Cx43출현재분포,이차영향봉극련접전도공능.