内蒙古农业大学学报（自然科学版）
內矇古農業大學學報（自然科學版）
내몽고농업대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF INNER MONGOLIA AGRICULTURAL UNIIVERSITY
2012年
4期
103-107
,共5页
黄帆%王明玖%何丽君%哈琴
黃帆%王明玖%何麗君%哈琴
황범%왕명구%하려군%합금
高加索三叶草%ISSR-PCR%优化
高加索三葉草%ISSR-PCR%優化
고가색삼협초%ISSR-PCR%우화
Caucasian clover%ISSR-PCR reaction system%optimization
高加索三叶草(Trifolium ambiguum Bieb.)是许多干旱和寒冷地区可以种植并在各方面表现优良的三叶草种,建立适用于高加索三叶草的ISSR反应体系,将为ISSR标记技术在三叶草属品种资源研究中的应用提供参考.本试验通过优化影响高加索三叶草ISSR-PCR的主要参数,建立适于高加索三叶草的ISSR反应体系和扩增程序.在25μL体系中各反应物的最适含量为:20 ng模板DNA,0.2 mmol/L dNTP,0.8μmol/L ISSR引物,1.0 U TaqDNA聚合酶,2.5μL 10×PCR Buffer,2.0mmol/L MgC12.PCR扩增程序为:94℃预变性2 min,94℃变性30s,55℃退火45s,72℃延伸1 min,共30个循环；72℃延伸7min,4℃保温.
高加索三葉草(Trifolium ambiguum Bieb.)是許多榦旱和寒冷地區可以種植併在各方麵錶現優良的三葉草種,建立適用于高加索三葉草的ISSR反應體繫,將為ISSR標記技術在三葉草屬品種資源研究中的應用提供參攷.本試驗通過優化影響高加索三葉草ISSR-PCR的主要參數,建立適于高加索三葉草的ISSR反應體繫和擴增程序.在25μL體繫中各反應物的最適含量為:20 ng模闆DNA,0.2 mmol/L dNTP,0.8μmol/L ISSR引物,1.0 U TaqDNA聚閤酶,2.5μL 10×PCR Buffer,2.0mmol/L MgC12.PCR擴增程序為:94℃預變性2 min,94℃變性30s,55℃退火45s,72℃延伸1 min,共30箇循環；72℃延伸7min,4℃保溫.
고가색삼협초(Trifolium ambiguum Bieb.)시허다간한화한랭지구가이충식병재각방면표현우량적삼협초충,건립괄용우고가색삼협초적ISSR반응체계,장위ISSR표기기술재삼협초속품충자원연구중적응용제공삼고.본시험통과우화영향고가색삼협초ISSR-PCR적주요삼수,건립괄우고가색삼협초적ISSR반응체계화확증정서.재25μL체계중각반응물적최괄함량위:20 ng모판DNA,0.2 mmol/L dNTP,0.8μmol/L ISSR인물,1.0 U TaqDNA취합매,2.5μL 10×PCR Buffer,2.0mmol/L MgC12.PCR확증정서위:94℃예변성2 min,94℃변성30s,55℃퇴화45s,72℃연신1 min,공30개순배；72℃연신7min,4℃보온.
