动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2013年
4期
27-32
,共6页
皮毛%动物病毒%基因芯片%检测
皮毛%動物病毒%基因芯片%檢測
피모%동물병독%기인심편%검측
根据GenBank上蓝舌病病毒(BTV)、O型口蹄疫病毒(FMDV)、山羊痘病毒(GPV)、绵羊痘病毒(SPPV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)等5种病毒的特异性保守序列,分别设计多重荧光标记引物和相应寡核苷酸探针.使用芯片点样液稀释各探针至终浓度30μmol/L,点样制备11×11阵列芯片.核酸杂交后,建立并优化基因芯片检测方法.结果显示,使用470 mL/L甲酰胺杂交液,42℃摇转杂交4h为最佳基因芯片杂交条件.建立的基因芯片检测方法与伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒(NDV)等无交叉反应,检测敏感性可达20拷贝病毒核酸.制备的基因芯片稳定,保存6个月可用.对151份临床样品进行基因芯片和商业化PCR试剂盒平行检测,两者的符合率为100％.
根據GenBank上藍舌病病毒(BTV)、O型口蹄疫病毒(FMDV)、山羊痘病毒(GPV)、綿羊痘病毒(SPPV)和牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)等5種病毒的特異性保守序列,分彆設計多重熒光標記引物和相應寡覈苷痠探針.使用芯片點樣液稀釋各探針至終濃度30μmol/L,點樣製備11×11陣列芯片.覈痠雜交後,建立併優化基因芯片檢測方法.結果顯示,使用470 mL/L甲酰胺雜交液,42℃搖轉雜交4h為最佳基因芯片雜交條件.建立的基因芯片檢測方法與偽狂犬病病毒(PRV)、豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)、禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒(NDV)等無交扠反應,檢測敏感性可達20拷貝病毒覈痠.製備的基因芯片穩定,保存6箇月可用.對151份臨床樣品進行基因芯片和商業化PCR試劑盒平行檢測,兩者的符閤率為100％.
근거GenBank상람설병병독(BTV)、O형구제역병독(FMDV)、산양두병독(GPV)、면양두병독(SPPV)화우병독성복사병독(BVDV)등5충병독적특이성보수서렬,분별설계다중형광표기인물화상응과핵감산탐침.사용심편점양액희석각탐침지종농도30μmol/L,점양제비11×11진렬심편.핵산잡교후,건립병우화기인심편검측방법.결과현시,사용470 mL/L갑선알잡교액,42℃요전잡교4h위최가기인심편잡교조건.건립적기인심편검측방법여위광견병병독(PRV)、저번식여호흡종합정병독(PRRSV)、금류감병독(AIV)화신성역병독(NDV)등무교차반응,검측민감성가체20고패병독핵산.제비적기인심편은정,보존6개월가용.대151빈림상양품진행기인심편화상업화PCR시제합평행검측,량자적부합솔위100％.
