动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2013年
4期
1-4
,共4页
崔鹏飞%邓国华%韦良孟%焦培荣%廖明
崔鵬飛%鄧國華%韋良孟%焦培榮%廖明
최붕비%산국화%위량맹%초배영%료명
鸡干扰素调节因子7%原核表达%多克隆抗体
鷄榦擾素調節因子7%原覈錶達%多剋隆抗體
계간우소조절인자7%원핵표체%다극륭항체
为表达鸡干扰素调节因子7蛋白并制备其多克隆抗体,通过RT-PCR技术扩增chIRF7基因的编码序列,构建重组质粒PET30a-chIRF7.将重组质粒转化至大肠埃希菌(E.coil) BL21 (DE3)后经IPTG诱导,SDS-PAGE结果显示,重组蛋白rchIRF7分子量约为60 ku.将纯化的重组蛋白免疫接种小鼠制备多克隆抗体,间接ELISA测定血清抗体滴度在1∶51 200以上,IFA检测结果显示制备的鼠抗chIRF7蛋白多抗能够与AIV刺激的CEF细胞内的chIRF7蛋白发生特异性反应,表明通过原核表达系统表达的重组蛋白rchIRF7具有很好的免疫原性,以其制备的鼠抗chIRF7蛋白多克隆抗体滴度高、特异性好.
為錶達鷄榦擾素調節因子7蛋白併製備其多剋隆抗體,通過RT-PCR技術擴增chIRF7基因的編碼序列,構建重組質粒PET30a-chIRF7.將重組質粒轉化至大腸埃希菌(E.coil) BL21 (DE3)後經IPTG誘導,SDS-PAGE結果顯示,重組蛋白rchIRF7分子量約為60 ku.將純化的重組蛋白免疫接種小鼠製備多剋隆抗體,間接ELISA測定血清抗體滴度在1∶51 200以上,IFA檢測結果顯示製備的鼠抗chIRF7蛋白多抗能夠與AIV刺激的CEF細胞內的chIRF7蛋白髮生特異性反應,錶明通過原覈錶達繫統錶達的重組蛋白rchIRF7具有很好的免疫原性,以其製備的鼠抗chIRF7蛋白多剋隆抗體滴度高、特異性好.
위표체계간우소조절인자7단백병제비기다극륭항체,통과RT-PCR기술확증chIRF7기인적편마서렬,구건중조질립PET30a-chIRF7.장중조질립전화지대장애희균(E.coil) BL21 (DE3)후경IPTG유도,SDS-PAGE결과현시,중조단백rchIRF7분자량약위60 ku.장순화적중조단백면역접충소서제비다극륭항체,간접ELISA측정혈청항체적도재1∶51 200이상,IFA검측결과현시제비적서항chIRF7단백다항능구여AIV자격적CEF세포내적chIRF7단백발생특이성반응,표명통과원핵표체계통표체적중조단백rchIRF7구유흔호적면역원성,이기제비적서항chIRF7단백다극륭항체적도고、특이성호.
