南方农业学报
南方農業學報
남방농업학보
GUANGXI AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
5期
838-843
,共6页
彭金霞%韦嫔媛%殷勤%蒋小珍%黎铭%陈晓汉
彭金霞%韋嬪媛%慇勤%蔣小珍%黎銘%陳曉漢
팽금하%위빈원%은근%장소진%려명%진효한
凡纳滨对虾%热休克蛋白%HSP10基因%低温%表达量%荧光定量PCR
凡納濱對蝦%熱休剋蛋白%HSP10基因%低溫%錶達量%熒光定量PCR
범납빈대하%열휴극단백%HSP10기인%저온%표체량%형광정량PCR
Litopenaeus vannmei%HSPs%HSP10 gene%low temperature%expression quantity%real-time PCR
[目的]克隆分析凡纳滨对虾HSP10基因,为研究其在寒冷耐受过程中发挥调控功能提供参考依据.[方法]搜索EST库获得凡纳滨对虾HSP10基因序列,再通过RACE-PCR扩增获得凡纳滨对虾HSP10基因cDNA全长序列,对其进行生物信息学分析,并通过荧光定量PCR分析HSP10基因的组织表达及低温胁迫下表达量的变化.[结果]凡纳滨对虾HSP1基因cDNA全长720 bp,包含306 bp的开放阅读框,编码102个氨基酸.以各物种的HSP10蛋白序列构建系统进化树,能较好反映各物种间的进化关系.荧光定量PCR分析结果显示,凡纳滨对虾HSP10mRNA在各组织中呈遍在表达,其中以肌肉中的表达量最高.低温表达谱分析结果显示,凡纳滨对虾HSP10mRNA在低温处理凡纳滨对虾的各组织中均呈下调表达,当处理温度降至13℃,其在肝胰腺中表达量降至最低.[结论]凡纳滨对虾HSP10在结构和进化上较保守,其mRNA表达量在低温胁迫下呈下降趋势,可能在寒冷耐受过程中发挥负调控作用.
[目的]剋隆分析凡納濱對蝦HSP10基因,為研究其在寒冷耐受過程中髮揮調控功能提供參攷依據.[方法]搜索EST庫穫得凡納濱對蝦HSP10基因序列,再通過RACE-PCR擴增穫得凡納濱對蝦HSP10基因cDNA全長序列,對其進行生物信息學分析,併通過熒光定量PCR分析HSP10基因的組織錶達及低溫脅迫下錶達量的變化.[結果]凡納濱對蝦HSP1基因cDNA全長720 bp,包含306 bp的開放閱讀框,編碼102箇氨基痠.以各物種的HSP10蛋白序列構建繫統進化樹,能較好反映各物種間的進化關繫.熒光定量PCR分析結果顯示,凡納濱對蝦HSP10mRNA在各組織中呈遍在錶達,其中以肌肉中的錶達量最高.低溫錶達譜分析結果顯示,凡納濱對蝦HSP10mRNA在低溫處理凡納濱對蝦的各組織中均呈下調錶達,噹處理溫度降至13℃,其在肝胰腺中錶達量降至最低.[結論]凡納濱對蝦HSP10在結構和進化上較保守,其mRNA錶達量在低溫脅迫下呈下降趨勢,可能在寒冷耐受過程中髮揮負調控作用.
[목적]극륭분석범납빈대하HSP10기인,위연구기재한랭내수과정중발휘조공공능제공삼고의거.[방법]수색EST고획득범납빈대하HSP10기인서렬,재통과RACE-PCR확증획득범납빈대하HSP10기인cDNA전장서렬,대기진행생물신식학분석,병통과형광정량PCR분석HSP10기인적조직표체급저온협박하표체량적변화.[결과]범납빈대하HSP1기인cDNA전장720 bp,포함306 bp적개방열독광,편마102개안기산.이각물충적HSP10단백서렬구건계통진화수,능교호반영각물충간적진화관계.형광정량PCR분석결과현시,범납빈대하HSP10mRNA재각조직중정편재표체,기중이기육중적표체량최고.저온표체보분석결과현시,범납빈대하HSP10mRNA재저온처리범납빈대하적각조직중균정하조표체,당처리온도강지13℃,기재간이선중표체량강지최저.[결론]범납빈대하HSP10재결구화진화상교보수,기mRNA표체량재저온협박하정하강추세,가능재한랭내수과정중발휘부조공작용.
