中华实用儿科临床杂志
中華實用兒科臨床雜誌
중화실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2013年
8期
589-591
,共3页
张潇潇%单晔%于宝生%高兰英%王安茹
張瀟瀟%單曄%于寶生%高蘭英%王安茹
장소소%단엽%우보생%고란영%왕안여
Kiss1基因%雌激素受体α%下丘脑%性发育%雌性Sprague-Dawley大鼠
Kiss1基因%雌激素受體α%下丘腦%性髮育%雌性Sprague-Dawley大鼠
Kiss1기인%자격소수체α%하구뇌%성발육%자성Sprague-Dawley대서
Kiss1 gene%Estrogen receptor α%Hypothalamus%Sexual development%Female Sprague-Dawley rat
目的 应用实时反转录(Real-time) PCR和ELISA法检测不同青春期发育阶段Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠下丘脑Kiss1 mRNA、雌激素受体α(ERα)mRNA的表达水平以及血清黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)水平,探讨Kiss1基因和ERα基因在大鼠性发育过程中的作用.方法 实验动物选用正常3日龄雌性SD大鼠35只,于出生22 d断奶后每日观察阴道开口情况,分别于出生15 d(幼年期组,n=19)和出生35 d(青春期组,n=16)处死动物,分离下丘脑组织,心脏采血法提取血清,标本均置-80℃冰箱保存备测；提取下丘脑标本的RNA,反转录后所得cDNA进行Real-time PCR检测,计算Kiss1基因和ERα基因的mRNA相对表达水平.ELISA方法检测其血清标本LH、E2水平.结果 1.大体观察:观察到青春期组大鼠阴道开口的时间为(32.1±1.0)d,幼年期组在处死前一直未观察到阴道开口.2.Real-time PCR结果显示,青春期组大鼠的Kiss1基因(5.39±2.52)和ERα基因(1.57±1.87)的表达,均显著高于幼年期组Kiss1基因(1.06±1.09)和ERα基因(0.59±0.68),差异均有统计学意义(P均＜0.001).3.ELISA结果显示,青春期组大鼠血清LH[(11.61±0.95) IU/L]和E2[(167.53±31.09) ng/L]水平,均显著高于幼年期组LH[(5.46±1.89) IU/L]和E2[(58.59 ±29.96) ng/L],差异均有统计学意义(P均＜0.001).结论 Kiss1基因和ERα基因参与雌性SD大鼠性发育的启动过程.
目的 應用實時反轉錄(Real-time) PCR和ELISA法檢測不同青春期髮育階段Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠下丘腦Kiss1 mRNA、雌激素受體α(ERα)mRNA的錶達水平以及血清黃體生成素(LH)、雌二醇(E2)水平,探討Kiss1基因和ERα基因在大鼠性髮育過程中的作用.方法 實驗動物選用正常3日齡雌性SD大鼠35隻,于齣生22 d斷奶後每日觀察陰道開口情況,分彆于齣生15 d(幼年期組,n=19)和齣生35 d(青春期組,n=16)處死動物,分離下丘腦組織,心髒採血法提取血清,標本均置-80℃冰箱保存備測；提取下丘腦標本的RNA,反轉錄後所得cDNA進行Real-time PCR檢測,計算Kiss1基因和ERα基因的mRNA相對錶達水平.ELISA方法檢測其血清標本LH、E2水平.結果 1.大體觀察:觀察到青春期組大鼠陰道開口的時間為(32.1±1.0)d,幼年期組在處死前一直未觀察到陰道開口.2.Real-time PCR結果顯示,青春期組大鼠的Kiss1基因(5.39±2.52)和ERα基因(1.57±1.87)的錶達,均顯著高于幼年期組Kiss1基因(1.06±1.09)和ERα基因(0.59±0.68),差異均有統計學意義(P均＜0.001).3.ELISA結果顯示,青春期組大鼠血清LH[(11.61±0.95) IU/L]和E2[(167.53±31.09) ng/L]水平,均顯著高于幼年期組LH[(5.46±1.89) IU/L]和E2[(58.59 ±29.96) ng/L],差異均有統計學意義(P均＜0.001).結論 Kiss1基因和ERα基因參與雌性SD大鼠性髮育的啟動過程.
목적 응용실시반전록(Real-time) PCR화ELISA법검측불동청춘기발육계단Sprague-Dawley(SD)자성대서하구뇌Kiss1 mRNA、자격소수체α(ERα)mRNA적표체수평이급혈청황체생성소(LH)、자이순(E2)수평,탐토Kiss1기인화ERα기인재대서성발육과정중적작용.방법 실험동물선용정상3일령자성SD대서35지,우출생22 d단내후매일관찰음도개구정황,분별우출생15 d(유년기조,n=19)화출생35 d(청춘기조,n=16)처사동물,분리하구뇌조직,심장채혈법제취혈청,표본균치-80℃빙상보존비측；제취하구뇌표본적RNA,반전록후소득cDNA진행Real-time PCR검측,계산Kiss1기인화ERα기인적mRNA상대표체수평.ELISA방법검측기혈청표본LH、E2수평.결과 1.대체관찰:관찰도청춘기조대서음도개구적시간위(32.1±1.0)d,유년기조재처사전일직미관찰도음도개구.2.Real-time PCR결과현시,청춘기조대서적Kiss1기인(5.39±2.52)화ERα기인(1.57±1.87)적표체,균현저고우유년기조Kiss1기인(1.06±1.09)화ERα기인(0.59±0.68),차이균유통계학의의(P균＜0.001).3.ELISA결과현시,청춘기조대서혈청LH[(11.61±0.95) IU/L]화E2[(167.53±31.09) ng/L]수평,균현저고우유년기조LH[(5.46±1.89) IU/L]화E2[(58.59 ±29.96) ng/L],차이균유통계학의의(P균＜0.001).결론 Kiss1기인화ERα기인삼여자성SD대서성발육적계동과정.
