中华实用儿科临床杂志
中華實用兒科臨床雜誌
중화실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2013年
8期
571-576
,共6页
徐爱晶%刘丽%李秀珍%陈志红%李堂
徐愛晶%劉麗%李秀珍%陳誌紅%李堂
서애정%류려%리수진%진지홍%리당
免疫治疗%糖尿病,1型%调节性T淋巴细胞%胰岛β细胞
免疫治療%糖尿病,1型%調節性T淋巴細胞%胰島β細胞
면역치료%당뇨병,1형%조절성T림파세포%이도β세포
Immunotherapy%Type 1 diabetes mellitus%T regulatory cells%Islet β cell
目的 观察腺病毒介导的胰岛素样生长因子-1(Ad-IGF-1)和IL-10基因(Ad-IL-10)联合免疫治疗对非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠胰岛炎、CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T淋巴细胞(Treg)的影响及其对胰岛β细胞的保护作用.方法 雌性NOD小鼠40只随机分为Ad-IGF-1组、Ad-IL-10组、Ad-IGF-1+ Ad-IL-10组(联合组)、腺病毒空载体Ad-绿色荧光蛋白(GFP)对照组、PBS对照组.分别腹腔注射Ad-IGF-1、Ad-IL-10、Ad-IGF-1和Ad-IL-10、Ad-GFP、PBS各100 μL,3周后重复1次.每周监测血糖、体质量变化及糖尿病(DM)发病率.反转录(RT)-PCR检测胰腺IGF-1、IL-10表达,ELISA法检测血清Th1/Th2细胞因子及胰岛素水平,病理学检查胰岛炎程度,流式细胞术分析CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg,TdT介导的dUTP缺口末端标记技术观察胰岛细胞凋亡并计数胰岛β细胞凋亡率.结果 腹腔注射Ad-IGF-1、Ad-IL-10可使IGF-1、IL-10在胰腺表达增强,IGF-1、IL-10单基因治疗可以减少DM的累积发病率,延缓DM的发生,增加体质量,联合组以上效果更加明显.联合组较单基因组降低胰岛炎积分效果更明显(P＜0.01)；联合基因干预明显降低TNF-α、IFN-γ水平,增加IL-10水平,调节Th1/Th2平衡；联合组CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞数为(7.17±0.38)％,与单基因组及对照组比较差异均有统计学意义(P均＜0.05)；联合组β细胞凋亡率为(10.29±2.20)％,低于单基因组及对照组,差异均有统计学意义(P均＜0.01).结论 IGF-1与IL-10基因联合治疗可增加CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞数,诱导免疫耐受,减少β细胞凋亡,促进胰岛β细胞重建,从而起到抗DM作用.
目的 觀察腺病毒介導的胰島素樣生長因子-1(Ad-IGF-1)和IL-10基因(Ad-IL-10)聯閤免疫治療對非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠胰島炎、CD4+ CD25+ Foxp3+調節性T淋巴細胞(Treg)的影響及其對胰島β細胞的保護作用.方法 雌性NOD小鼠40隻隨機分為Ad-IGF-1組、Ad-IL-10組、Ad-IGF-1+ Ad-IL-10組(聯閤組)、腺病毒空載體Ad-綠色熒光蛋白(GFP)對照組、PBS對照組.分彆腹腔註射Ad-IGF-1、Ad-IL-10、Ad-IGF-1和Ad-IL-10、Ad-GFP、PBS各100 μL,3週後重複1次.每週鑑測血糖、體質量變化及糖尿病(DM)髮病率.反轉錄(RT)-PCR檢測胰腺IGF-1、IL-10錶達,ELISA法檢測血清Th1/Th2細胞因子及胰島素水平,病理學檢查胰島炎程度,流式細胞術分析CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg,TdT介導的dUTP缺口末耑標記技術觀察胰島細胞凋亡併計數胰島β細胞凋亡率.結果 腹腔註射Ad-IGF-1、Ad-IL-10可使IGF-1、IL-10在胰腺錶達增彊,IGF-1、IL-10單基因治療可以減少DM的纍積髮病率,延緩DM的髮生,增加體質量,聯閤組以上效果更加明顯.聯閤組較單基因組降低胰島炎積分效果更明顯(P＜0.01)；聯閤基因榦預明顯降低TNF-α、IFN-γ水平,增加IL-10水平,調節Th1/Th2平衡；聯閤組CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg細胞數為(7.17±0.38)％,與單基因組及對照組比較差異均有統計學意義(P均＜0.05)；聯閤組β細胞凋亡率為(10.29±2.20)％,低于單基因組及對照組,差異均有統計學意義(P均＜0.01).結論 IGF-1與IL-10基因聯閤治療可增加CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg細胞數,誘導免疫耐受,減少β細胞凋亡,促進胰島β細胞重建,從而起到抗DM作用.
목적 관찰선병독개도적이도소양생장인자-1(Ad-IGF-1)화IL-10기인(Ad-IL-10)연합면역치료대비비반성당뇨병(NOD)소서이도염、CD4+ CD25+ Foxp3+조절성T림파세포(Treg)적영향급기대이도β세포적보호작용.방법 자성NOD소서40지수궤분위Ad-IGF-1조、Ad-IL-10조、Ad-IGF-1+ Ad-IL-10조(연합조)、선병독공재체Ad-록색형광단백(GFP)대조조、PBS대조조.분별복강주사Ad-IGF-1、Ad-IL-10、Ad-IGF-1화Ad-IL-10、Ad-GFP、PBS각100 μL,3주후중복1차.매주감측혈당、체질량변화급당뇨병(DM)발병솔.반전록(RT)-PCR검측이선IGF-1、IL-10표체,ELISA법검측혈청Th1/Th2세포인자급이도소수평,병이학검사이도염정도,류식세포술분석CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg,TdT개도적dUTP결구말단표기기술관찰이도세포조망병계수이도β세포조망솔.결과 복강주사Ad-IGF-1、Ad-IL-10가사IGF-1、IL-10재이선표체증강,IGF-1、IL-10단기인치료가이감소DM적루적발병솔,연완DM적발생,증가체질량,연합조이상효과경가명현.연합조교단기인조강저이도염적분효과경명현(P＜0.01)；연합기인간예명현강저TNF-α、IFN-γ수평,증가IL-10수평,조절Th1/Th2평형；연합조CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg세포수위(7.17±0.38)％,여단기인조급대조조비교차이균유통계학의의(P균＜0.05)；연합조β세포조망솔위(10.29±2.20)％,저우단기인조급대조조,차이균유통계학의의(P균＜0.01).결론 IGF-1여IL-10기인연합치료가증가CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg세포수,유도면역내수,감소β세포조망,촉진이도β세포중건,종이기도항DM작용.
