东南国防医药
東南國防醫藥
동남국방의약
JOURNAL OF SOUTHEAST CHINA NATIONAL DEFENCE MEDICAL SCIENCE
2013年
3期
215-218
,共4页
梁洪军%李晶%王永山%魏德江%陈琼%周东明%唐雨德
樑洪軍%李晶%王永山%魏德江%陳瓊%週東明%唐雨德
량홍군%리정%왕영산%위덕강%진경%주동명%당우덕
沙门菌%荧光定量PCR%检测
沙門菌%熒光定量PCR%檢測
사문균%형광정량PCR%검측
Salmonella%fluorescence quantitative PCR%detecting
目的 应用荧光定量PCR技术检测食品中沙门菌,为病原监测和快速诊断提供实验依据.方法 选择沙门菌invA基因设计引物,应用SYBR(R) Green Ⅰ染料建立荧光定量PCR法.分别对61株沙门菌、14株非沙门菌以及食品模拟标本、市售禽蛋制品进行检测,观察方法的特异性、敏感性和可行性.结果 建立的荧光定量PCR法检测所有沙门菌均出现了特异的熔解曲线,扩增产物的熔点值79.6 ℃左右；目标菌DNA的扩增产物循环数(Ct值)为20,空白对照及非沙门菌的Ct值大于30,非沙门菌均未出现特异的熔解曲线.每反应最低检测的沙门菌数是31 CFU;对食品中人工污染的沙门菌的检测,最低检测量是l CFU,检测时间为7～8h,与培养法比较,阳性符合率100％；对市售的369份禽蛋制品进行检测,阳性结果19份,而细菌培养法检测阳性结果为12份.结论 基于SYBR(R) Green Ⅰ染料建立的荧光定量PCR检测沙门菌是敏感、特异、省时、省力的方法,适用于沙门菌快速检测.
目的 應用熒光定量PCR技術檢測食品中沙門菌,為病原鑑測和快速診斷提供實驗依據.方法 選擇沙門菌invA基因設計引物,應用SYBR(R) Green Ⅰ染料建立熒光定量PCR法.分彆對61株沙門菌、14株非沙門菌以及食品模擬標本、市售禽蛋製品進行檢測,觀察方法的特異性、敏感性和可行性.結果 建立的熒光定量PCR法檢測所有沙門菌均齣現瞭特異的鎔解麯線,擴增產物的鎔點值79.6 ℃左右；目標菌DNA的擴增產物循環數(Ct值)為20,空白對照及非沙門菌的Ct值大于30,非沙門菌均未齣現特異的鎔解麯線.每反應最低檢測的沙門菌數是31 CFU;對食品中人工汙染的沙門菌的檢測,最低檢測量是l CFU,檢測時間為7～8h,與培養法比較,暘性符閤率100％；對市售的369份禽蛋製品進行檢測,暘性結果19份,而細菌培養法檢測暘性結果為12份.結論 基于SYBR(R) Green Ⅰ染料建立的熒光定量PCR檢測沙門菌是敏感、特異、省時、省力的方法,適用于沙門菌快速檢測.
목적 응용형광정량PCR기술검측식품중사문균,위병원감측화쾌속진단제공실험의거.방법 선택사문균invA기인설계인물,응용SYBR(R) Green Ⅰ염료건립형광정량PCR법.분별대61주사문균、14주비사문균이급식품모의표본、시수금단제품진행검측,관찰방법적특이성、민감성화가행성.결과 건립적형광정량PCR법검측소유사문균균출현료특이적용해곡선,확증산물적용점치79.6 ℃좌우；목표균DNA적확증산물순배수(Ct치)위20,공백대조급비사문균적Ct치대우30,비사문균균미출현특이적용해곡선.매반응최저검측적사문균수시31 CFU;대식품중인공오염적사문균적검측,최저검측량시l CFU,검측시간위7～8h,여배양법비교,양성부합솔100％；대시수적369빈금단제품진행검측,양성결과19빈,이세균배양법검측양성결과위12빈.결론 기우SYBR(R) Green Ⅰ염료건립적형광정량PCR검측사문균시민감、특이、성시、성력적방법,괄용우사문균쾌속검측.
