食品与生物技术学报
食品與生物技術學報
식품여생물기술학보
JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY
2013年
5期
501-508
,共8页
王文凤%吴世嘉%马小媛%夏雨%王周平
王文鳳%吳世嘉%馬小媛%夏雨%王週平
왕문봉%오세가%마소원%하우%왕주평
适配体识别%纳米金变色%可视化
適配體識彆%納米金變色%可視化
괄배체식별%납미금변색%가시화
基于核酸适配体识别和纳米金变色效应构建了伏马菌素B1 (FB1)的可视化检测新方法.实验以纳米金为载体,首先在纳米金表面组装巯基化的适配体互补短链DNA1/FB1-适配体复合物;当加入目标物时,适配体链与目标物结合,与互补短链DNA1发生解离;此时再加入纳米金标记的与适配体互补短链1互补的短链DNA2,二者杂交可导致纳米金粒子的聚集而使溶液颜色发生变化,进而实现目标物的可视化检测.通过条件优化,有效避免了由于盐浓度过高使纳米金发生聚集所产生的误差.同时在纳米金与短链DNA孵化时加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS),使NaCl浓度达到了500 mmol/L而纳米金颜色仍不发生改变,打破了以往熟化NaCl浓度100 mmol/L就使纳米金颜色发生变化的界限,使附着在纳米金上的DNA量扩大了3倍.方法检测线性范围为125~1 500 ng/L,检测限为125 ng/L.该方法已成功应用于啤酒中FB1的检测.
基于覈痠適配體識彆和納米金變色效應構建瞭伏馬菌素B1 (FB1)的可視化檢測新方法.實驗以納米金為載體,首先在納米金錶麵組裝巰基化的適配體互補短鏈DNA1/FB1-適配體複閤物;噹加入目標物時,適配體鏈與目標物結閤,與互補短鏈DNA1髮生解離;此時再加入納米金標記的與適配體互補短鏈1互補的短鏈DNA2,二者雜交可導緻納米金粒子的聚集而使溶液顏色髮生變化,進而實現目標物的可視化檢測.通過條件優化,有效避免瞭由于鹽濃度過高使納米金髮生聚集所產生的誤差.同時在納米金與短鏈DNA孵化時加入錶麵活性劑十二烷基硫痠鈉(SDS),使NaCl濃度達到瞭500 mmol/L而納米金顏色仍不髮生改變,打破瞭以往熟化NaCl濃度100 mmol/L就使納米金顏色髮生變化的界限,使附著在納米金上的DNA量擴大瞭3倍.方法檢測線性範圍為125~1 500 ng/L,檢測限為125 ng/L.該方法已成功應用于啤酒中FB1的檢測.
기우핵산괄배체식별화납미금변색효응구건료복마균소B1 (FB1)적가시화검측신방법.실험이납미금위재체,수선재납미금표면조장구기화적괄배체호보단련DNA1/FB1-괄배체복합물;당가입목표물시,괄배체련여목표물결합,여호보단련DNA1발생해리;차시재가입납미금표기적여괄배체호보단련1호보적단련DNA2,이자잡교가도치납미금입자적취집이사용액안색발생변화,진이실현목표물적가시화검측.통과조건우화,유효피면료유우염농도과고사납미금발생취집소산생적오차.동시재납미금여단련DNA부화시가입표면활성제십이완기류산납(SDS),사NaCl농도체도료500 mmol/L이납미금안색잉불발생개변,타파료이왕숙화NaCl농도100 mmol/L취사납미금안색발생변화적계한,사부착재납미금상적DNA량확대료3배.방법검측선성범위위125~1 500 ng/L,검측한위125 ng/L.해방법이성공응용우비주중FB1적검측.