中国家禽
中國傢禽
중국가금
CHINA POULTRY
2013年
10期
18-21,25
,共5页
王秀臻%张培培%程合刚%刘绍琼%孙淑红
王秀臻%張培培%程閤剛%劉紹瓊%孫淑紅
왕수진%장배배%정합강%류소경%손숙홍
细胞上清%DF1细胞%外源性禽白血病病毒%快速检测
細胞上清%DF1細胞%外源性禽白血病病毒%快速檢測
세포상청%DF1세포%외원성금백혈병병독%쾌속검측
本研究旨在探究用DF1细胞替代DF1细胞上清对外源性禽白血病病毒(ALV)进行快速检测.采集ALV p27抗原阳性的地方品种百日鸡的抗凝血22份,阴性鸡的抗凝血2份,离心取白细胞接种DF1细胞培养,重复9块24孔细胞培养板.每隔24 h取1块24孔板,分别收集细胞上清与DF1细胞于-20℃冻存,直至第9天,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测所有细胞上清与DF1细胞中的ALV p27抗原,并采用SPSS Statistics 17.0软件比较分析细胞上清与DF1细胞中ALV p27抗原S/P值的差异性与相关性.结果显示:培养8d的细胞上清中可检测到所有的15份阳性样品,而培养4d即可在DF1细胞中检出所有阳性样品(15份)；15份外源性ALV样品在细胞上清中初始检出p27抗原阳性时,同一培养时间的DF1细胞中的S/P值均明显高于细胞上清中的S/P值,差异极显著(P＜0.01)；培养4～5 d的DF1细胞与第9天收集的细胞上清中p27抗原S/P值相关性最高,分别为0.946、0.923.本研究显示,检测培养4～5 d的DF1细胞中的ALV p27抗原与经典方法所要求的检测培养9d的细胞上清中的ALV p27抗原可达到相同的效果.
本研究旨在探究用DF1細胞替代DF1細胞上清對外源性禽白血病病毒(ALV)進行快速檢測.採集ALV p27抗原暘性的地方品種百日鷄的抗凝血22份,陰性鷄的抗凝血2份,離心取白細胞接種DF1細胞培養,重複9塊24孔細胞培養闆.每隔24 h取1塊24孔闆,分彆收集細胞上清與DF1細胞于-20℃凍存,直至第9天,採用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測所有細胞上清與DF1細胞中的ALV p27抗原,併採用SPSS Statistics 17.0軟件比較分析細胞上清與DF1細胞中ALV p27抗原S/P值的差異性與相關性.結果顯示:培養8d的細胞上清中可檢測到所有的15份暘性樣品,而培養4d即可在DF1細胞中檢齣所有暘性樣品(15份)；15份外源性ALV樣品在細胞上清中初始檢齣p27抗原暘性時,同一培養時間的DF1細胞中的S/P值均明顯高于細胞上清中的S/P值,差異極顯著(P＜0.01)；培養4～5 d的DF1細胞與第9天收集的細胞上清中p27抗原S/P值相關性最高,分彆為0.946、0.923.本研究顯示,檢測培養4～5 d的DF1細胞中的ALV p27抗原與經典方法所要求的檢測培養9d的細胞上清中的ALV p27抗原可達到相同的效果.
본연구지재탐구용DF1세포체대DF1세포상청대외원성금백혈병병독(ALV)진행쾌속검측.채집ALV p27항원양성적지방품충백일계적항응혈22빈,음성계적항응혈2빈,리심취백세포접충DF1세포배양,중복9괴24공세포배양판.매격24 h취1괴24공판,분별수집세포상청여DF1세포우-20℃동존,직지제9천,채용매련면역흡부시험(ELISA)검측소유세포상청여DF1세포중적ALV p27항원,병채용SPSS Statistics 17.0연건비교분석세포상청여DF1세포중ALV p27항원S/P치적차이성여상관성.결과현시:배양8d적세포상청중가검측도소유적15빈양성양품,이배양4d즉가재DF1세포중검출소유양성양품(15빈)；15빈외원성ALV양품재세포상청중초시검출p27항원양성시,동일배양시간적DF1세포중적S/P치균명현고우세포상청중적S/P치,차이겁현저(P＜0.01)；배양4～5 d적DF1세포여제9천수집적세포상청중p27항원S/P치상관성최고,분별위0.946、0.923.본연구현시,검측배양4～5 d적DF1세포중적ALV p27항원여경전방법소요구적검측배양9d적세포상청중적ALV p27항원가체도상동적효과.
