中华实用儿科临床杂志
中華實用兒科臨床雜誌
중화실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2013年
10期
733-736
,共4页
成亮%陈淳媛%朱咏贵%黄利华%闾宏伟%杨作成
成亮%陳淳媛%硃詠貴%黃利華%閭宏偉%楊作成
성량%진순원%주영귀%황리화%려굉위%양작성
柯萨奇病毒B3%Hela细胞%血清剥夺%mTOR
柯薩奇病毒B3%Hela細胞%血清剝奪%mTOR
가살기병독B3%Hela세포%혈청박탈%mTOR
Coxsackie virus B3%Hela cell%Serum deprivation%mTOR
目的 探讨不同营养状况下柯萨奇病毒B3(CVB3)感染HeLa细胞对mTOR信号通路的影响.方法 采用非饥饿法和饥饿法2种方法培养HeLa细胞.(1)非饥饿法:HeLa细胞融合成40％ ～ 50％的单层细胞时,用含10 g/L胎牛血清的细胞培养液换液培养24 h后,病毒组用100倍半数感染量(100 TCID50)的病毒干预,而对照组用病毒维持液(含胎牛血清2 g/L细胞培养液)培养；(2)“饥饿法”:待HeLa细胞融合成40％ ～ 50％的单层细胞时,用不含胎牛血清的培养基换液培养24 h后,病毒组用100 TCID50的病毒干预,而对照组用病毒维持液(含胎牛血清2 g/L的细胞培养液)培养.采用倒置显微镜观察细胞形态学变化,用实时荧光定量PCR检测3、6、9、12、24 h不同时间点饥饿法及非饥饿法不同营养状态下HeLa细胞mTOR、p70S6KmRNA表达.结果 非饥饿法:病毒组仅在12 h及24 h mTOR、p70S6K mRNA表达显著低于对照组(P均＜0.05)；饥饿法:病毒组各时间点均显著低于对照组(P均＜0.05)；饥饿法病毒组和对照组Hela细胞mTOR、p70S6K mRNA表达均高于非饥饿法,mTOR mRNA差异均有统计学意义(P均＜0.05),而p70S6K mRNA差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 CVB3使HeLa细胞mTOR-P70S6K信号通路表达下调.
目的 探討不同營養狀況下柯薩奇病毒B3(CVB3)感染HeLa細胞對mTOR信號通路的影響.方法 採用非饑餓法和饑餓法2種方法培養HeLa細胞.(1)非饑餓法:HeLa細胞融閤成40％ ～ 50％的單層細胞時,用含10 g/L胎牛血清的細胞培養液換液培養24 h後,病毒組用100倍半數感染量(100 TCID50)的病毒榦預,而對照組用病毒維持液(含胎牛血清2 g/L細胞培養液)培養；(2)“饑餓法”:待HeLa細胞融閤成40％ ～ 50％的單層細胞時,用不含胎牛血清的培養基換液培養24 h後,病毒組用100 TCID50的病毒榦預,而對照組用病毒維持液(含胎牛血清2 g/L的細胞培養液)培養.採用倒置顯微鏡觀察細胞形態學變化,用實時熒光定量PCR檢測3、6、9、12、24 h不同時間點饑餓法及非饑餓法不同營養狀態下HeLa細胞mTOR、p70S6KmRNA錶達.結果 非饑餓法:病毒組僅在12 h及24 h mTOR、p70S6K mRNA錶達顯著低于對照組(P均＜0.05)；饑餓法:病毒組各時間點均顯著低于對照組(P均＜0.05)；饑餓法病毒組和對照組Hela細胞mTOR、p70S6K mRNA錶達均高于非饑餓法,mTOR mRNA差異均有統計學意義(P均＜0.05),而p70S6K mRNA差異均無統計學意義(P均＞0.05).結論 CVB3使HeLa細胞mTOR-P70S6K信號通路錶達下調.
목적 탐토불동영양상황하가살기병독B3(CVB3)감염HeLa세포대mTOR신호통로적영향.방법 채용비기아법화기아법2충방법배양HeLa세포.(1)비기아법:HeLa세포융합성40％ ～ 50％적단층세포시,용함10 g/L태우혈청적세포배양액환액배양24 h후,병독조용100배반수감염량(100 TCID50)적병독간예,이대조조용병독유지액(함태우혈청2 g/L세포배양액)배양；(2)“기아법”:대HeLa세포융합성40％ ～ 50％적단층세포시,용불함태우혈청적배양기환액배양24 h후,병독조용100 TCID50적병독간예,이대조조용병독유지액(함태우혈청2 g/L적세포배양액)배양.채용도치현미경관찰세포형태학변화,용실시형광정량PCR검측3、6、9、12、24 h불동시간점기아법급비기아법불동영양상태하HeLa세포mTOR、p70S6KmRNA표체.결과 비기아법:병독조부재12 h급24 h mTOR、p70S6K mRNA표체현저저우대조조(P균＜0.05)；기아법:병독조각시간점균현저저우대조조(P균＜0.05)；기아법병독조화대조조Hela세포mTOR、p70S6K mRNA표체균고우비기아법,mTOR mRNA차이균유통계학의의(P균＜0.05),이p70S6K mRNA차이균무통계학의의(P균＞0.05).결론 CVB3사HeLa세포mTOR-P70S6K신호통로표체하조.
