中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2013年
5期
798-801
,共4页
付琳%裘宇容%姜云飞%夏佳音%王海芳
付琳%裘宇容%薑雲飛%夏佳音%王海芳
부림%구우용%강운비%하가음%왕해방
环瓜氨酸肽%胶乳颗粒%化学偶联
環瓜氨痠肽%膠乳顆粒%化學偶聯
배과안산태%효유과립%화학우련
目的 探讨颗粒型环瓜氨酸肽抗原的制备方法,并对实验条件进行优化.方法 通过碳二亚胺交联法将人工合成的CCP与BSA共价偶联,使偶联产物蛋白大小在70-170 KD之间,经紫外吸收光谱鉴定偶联成功.采用碳二亚胺两步法将偶联成功的CCP与BSA复合物又与聚苯乙烯微球偶联,优化偶联条件,根据蛋白偶联量和偶联效率判断偶联效果.结果 (1)BSA与CCP偶联质量比为1∶1,EDC与NHS用量比为2∶3,偶联pH为6.0,BSA与CCP偶联可以达到较好的效果.BSA与CCP偶联产物在70 KD-170 KD之间,紫外吸收峰有明显左移.(2)微球与偶联蛋白的吸附效率随着EDC用量的增大而增大,当EDC用量达到7.5 mg/ml时,偶联蛋白最大效率达到63.66%.(3)随着偶联时间的延长,蛋白偶联微球的效率不断增加,在偶联时间为0.5-2 h内,偶联效率增加最快,当反应时间2 h后,反应趋于平衡.(4)对不同偶联反应pH值条件进行筛选,pH为7.5时偶联效果最好,pH7.0-8.0为适宜偶联的pH范围.结论 CCP-BSA偶联产物蛋白与胶乳颗粒偶联,当EDC浓度为7.5 mg/ml,偶联时间为2 h,反应PH值为7.5,蛋白偶联效率可达到63.66%.
目的 探討顆粒型環瓜氨痠肽抗原的製備方法,併對實驗條件進行優化.方法 通過碳二亞胺交聯法將人工閤成的CCP與BSA共價偶聯,使偶聯產物蛋白大小在70-170 KD之間,經紫外吸收光譜鑒定偶聯成功.採用碳二亞胺兩步法將偶聯成功的CCP與BSA複閤物又與聚苯乙烯微毬偶聯,優化偶聯條件,根據蛋白偶聯量和偶聯效率判斷偶聯效果.結果 (1)BSA與CCP偶聯質量比為1∶1,EDC與NHS用量比為2∶3,偶聯pH為6.0,BSA與CCP偶聯可以達到較好的效果.BSA與CCP偶聯產物在70 KD-170 KD之間,紫外吸收峰有明顯左移.(2)微毬與偶聯蛋白的吸附效率隨著EDC用量的增大而增大,噹EDC用量達到7.5 mg/ml時,偶聯蛋白最大效率達到63.66%.(3)隨著偶聯時間的延長,蛋白偶聯微毬的效率不斷增加,在偶聯時間為0.5-2 h內,偶聯效率增加最快,噹反應時間2 h後,反應趨于平衡.(4)對不同偶聯反應pH值條件進行篩選,pH為7.5時偶聯效果最好,pH7.0-8.0為適宜偶聯的pH範圍.結論 CCP-BSA偶聯產物蛋白與膠乳顆粒偶聯,噹EDC濃度為7.5 mg/ml,偶聯時間為2 h,反應PH值為7.5,蛋白偶聯效率可達到63.66%.
목적 탐토과립형배과안산태항원적제비방법,병대실험조건진행우화.방법 통과탄이아알교련법장인공합성적CCP여BSA공개우련,사우련산물단백대소재70-170 KD지간,경자외흡수광보감정우련성공.채용탄이아알량보법장우련성공적CCP여BSA복합물우여취분을희미구우련,우화우련조건,근거단백우련량화우련효솔판단우련효과.결과 (1)BSA여CCP우련질량비위1∶1,EDC여NHS용량비위2∶3,우련pH위6.0,BSA여CCP우련가이체도교호적효과.BSA여CCP우련산물재70 KD-170 KD지간,자외흡수봉유명현좌이.(2)미구여우련단백적흡부효솔수착EDC용량적증대이증대,당EDC용량체도7.5 mg/ml시,우련단백최대효솔체도63.66%.(3)수착우련시간적연장,단백우련미구적효솔불단증가,재우련시간위0.5-2 h내,우련효솔증가최쾌,당반응시간2 h후,반응추우평형.(4)대불동우련반응pH치조건진행사선,pH위7.5시우련효과최호,pH7.0-8.0위괄의우련적pH범위.결론 CCP-BSA우련산물단백여효유과립우련,당EDC농도위7.5 mg/ml,우련시간위2 h,반응PH치위7.5,단백우련효솔가체도63.66%.
