应用化学
應用化學
응용화학
CHINESE JOURNAL OF APPLIED CHEMISTRY
2013年
5期
555-559
,共5页
耿韶光%江晓莹%崔凤灵%时蕾
耿韶光%江曉瑩%崔鳳靈%時蕾
경소광%강효형%최봉령%시뢰
蒽醌缩对甲氧基苯基氨基硫脲%人血清白蛋白%三维荧光光谱%同步荧光光谱
蒽醌縮對甲氧基苯基氨基硫脲%人血清白蛋白%三維熒光光譜%同步熒光光譜
은곤축대갑양기분기안기류뇨%인혈청백단백%삼유형광광보%동보형광광보
在Tris-HC1缓冲溶液体系中(pH=7.4),研究了1,4-二羟基-2-甲酰基-9,10-蒽醌缩对甲氧基苯基氨基硫脲(EN)与人血清白蛋白(HSA)体系的荧光猝灭光谱和三维荧光光谱,证明EN与HSA可以发生相互作用,使人血清白蛋白的疏水微环境的极性以及构象发生变化.考察了Δλ值、反应介质和离子强度等因素对体系同步荧光光谱特征及强度的影响.在此基础上,建立了以EN为分子探针,运用固定波长同步荧光光谱法测定生物样品中的蛋白质含量的方法.在最佳实验条件下,体系同步荧光强度与HSA在1.380～165.6 mg/L范围内呈良好的线性关系.对11份空白溶液进行平行测定,检出限达到0.414 mg/L,相对标准偏差为1.52％.运用此方法对血清、唾液、尿液进行了加标回收实验,回收率在98.4％～105％.且同步荧光光谱法测定结果与考马斯亮蓝法基本一致.
在Tris-HC1緩遲溶液體繫中(pH=7.4),研究瞭1,4-二羥基-2-甲酰基-9,10-蒽醌縮對甲氧基苯基氨基硫脲(EN)與人血清白蛋白(HSA)體繫的熒光猝滅光譜和三維熒光光譜,證明EN與HSA可以髮生相互作用,使人血清白蛋白的疏水微環境的極性以及構象髮生變化.攷察瞭Δλ值、反應介質和離子彊度等因素對體繫同步熒光光譜特徵及彊度的影響.在此基礎上,建立瞭以EN為分子探針,運用固定波長同步熒光光譜法測定生物樣品中的蛋白質含量的方法.在最佳實驗條件下,體繫同步熒光彊度與HSA在1.380～165.6 mg/L範圍內呈良好的線性關繫.對11份空白溶液進行平行測定,檢齣限達到0.414 mg/L,相對標準偏差為1.52％.運用此方法對血清、唾液、尿液進行瞭加標迴收實驗,迴收率在98.4％～105％.且同步熒光光譜法測定結果與攷馬斯亮藍法基本一緻.
재Tris-HC1완충용액체계중(pH=7.4),연구료1,4-이간기-2-갑선기-9,10-은곤축대갑양기분기안기류뇨(EN)여인혈청백단백(HSA)체계적형광졸멸광보화삼유형광광보,증명EN여HSA가이발생상호작용,사인혈청백단백적소수미배경적겁성이급구상발생변화.고찰료Δλ치、반응개질화리자강도등인소대체계동보형광광보특정급강도적영향.재차기출상,건립료이EN위분자탐침,운용고정파장동보형광광보법측정생물양품중적단백질함량적방법.재최가실험조건하,체계동보형광강도여HSA재1.380～165.6 mg/L범위내정량호적선성관계.대11빈공백용액진행평행측정,검출한체도0.414 mg/L,상대표준편차위1.52％.운용차방법대혈청、타액、뇨액진행료가표회수실험,회수솔재98.4％～105％.차동보형광광보법측정결과여고마사량람법기본일치.
