中药新药与临床药理
中藥新藥與臨床藥理
중약신약여림상약리
TRADITIONAL CHINESE DRUG RESEARCH&CLINICAL PHARMACOLOGY
2013年
2期
135-139
,共5页
酸枣仁总皂苷%过氧化氢%心肌细胞%凋亡%蛋白激酶C Eplison亚型
痠棘仁總皂苷%過氧化氫%心肌細胞%凋亡%蛋白激酶C Eplison亞型
산조인총조감%과양화경%심기세포%조망%단백격매C Eplison아형
目的 观察酸枣仁总皂苷对过氧化氢损伤心肌细胞的保护作用及其机制.方法 采用差速贴壁法分离培养1～3 d Wistar新生乳鼠心肌细胞,以过氧化氢作用心肌细胞建立氧化损伤模型,将培养72 h的原代心肌细胞,选择搏动良好、生长密度无明显差异的细胞按孔随机分为以下4组:①空白对照组:细胞培养过程中不给予任何处理；②模型组:心肌细胞培养基中加终浓度为400μmol·L 1过氧化氢作用4h;③酸枣仁总皂苷治疗组:操作同模型组,造模前予酸枣仁总皂苷(20 mg· L-1)干预24 h；④蛋白激酶C抑制剂组:操作同治疗组,但在造模-前5 min予白屈菜红碱(5 μmol·L-1).倒置显微镜观察心肌细胞形态学变化；四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测心肌细胞活力；流式细胞仪检测细胞凋亡率；免疫印迹技术检测心肌细胞膜蛋白中蛋白激酶C Eplison亚型(PKCε)的表达.结果 与空白对照组比较,模型组经400 μmol· L-1过氧化氢作用4h后,细胞核暗淡,伪足显著变细,细胞间连接明显减少,搏动节律减慢,细胞活力显著下降(P＜0.001),细胞凋亡率显著增高(P＜0.001),PKCε的表达差异无统计学意义(P＞0.05).与模型组比较,酸枣仁总皂苷能使心肌细胞形态明显改善,显著提高细胞活力、降低细胞凋亡率及升高PKCδ的表达,差异有统计学意义(P＜0.001).PKC抑制剂白屈菜红碱可显著减弱酸枣仁总皂苷的保护作用,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 酸枣仁总皂苷对过氧化氢损伤大鼠心肌细胞具有保护作用,其机制可能与激活PKCε有关.
目的 觀察痠棘仁總皂苷對過氧化氫損傷心肌細胞的保護作用及其機製.方法 採用差速貼壁法分離培養1～3 d Wistar新生乳鼠心肌細胞,以過氧化氫作用心肌細胞建立氧化損傷模型,將培養72 h的原代心肌細胞,選擇搏動良好、生長密度無明顯差異的細胞按孔隨機分為以下4組:①空白對照組:細胞培養過程中不給予任何處理；②模型組:心肌細胞培養基中加終濃度為400μmol·L 1過氧化氫作用4h;③痠棘仁總皂苷治療組:操作同模型組,造模前予痠棘仁總皂苷(20 mg· L-1)榦預24 h；④蛋白激酶C抑製劑組:操作同治療組,但在造模-前5 min予白屈菜紅堿(5 μmol·L-1).倒置顯微鏡觀察心肌細胞形態學變化；四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法檢測心肌細胞活力；流式細胞儀檢測細胞凋亡率；免疫印跡技術檢測心肌細胞膜蛋白中蛋白激酶C Eplison亞型(PKCε)的錶達.結果 與空白對照組比較,模型組經400 μmol· L-1過氧化氫作用4h後,細胞覈暗淡,偽足顯著變細,細胞間連接明顯減少,搏動節律減慢,細胞活力顯著下降(P＜0.001),細胞凋亡率顯著增高(P＜0.001),PKCε的錶達差異無統計學意義(P＞0.05).與模型組比較,痠棘仁總皂苷能使心肌細胞形態明顯改善,顯著提高細胞活力、降低細胞凋亡率及升高PKCδ的錶達,差異有統計學意義(P＜0.001).PKC抑製劑白屈菜紅堿可顯著減弱痠棘仁總皂苷的保護作用,差異有統計學意義(P＜0.01).結論 痠棘仁總皂苷對過氧化氫損傷大鼠心肌細胞具有保護作用,其機製可能與激活PKCε有關.
목적 관찰산조인총조감대과양화경손상심기세포적보호작용급기궤제.방법 채용차속첩벽법분리배양1～3 d Wistar신생유서심기세포,이과양화경작용심기세포건립양화손상모형,장배양72 h적원대심기세포,선택박동량호、생장밀도무명현차이적세포안공수궤분위이하4조:①공백대조조:세포배양과정중불급여임하처리；②모형조:심기세포배양기중가종농도위400μmol·L 1과양화경작용4h;③산조인총조감치료조:조작동모형조,조모전여산조인총조감(20 mg· L-1)간예24 h；④단백격매C억제제조:조작동치료조,단재조모-전5 min여백굴채홍감(5 μmol·L-1).도치현미경관찰심기세포형태학변화；사갑기우담서염(MTT)비색법검측심기세포활력；류식세포의검측세포조망솔；면역인적기술검측심기세포막단백중단백격매C Eplison아형(PKCε)적표체.결과 여공백대조조비교,모형조경400 μmol· L-1과양화경작용4h후,세포핵암담,위족현저변세,세포간련접명현감소,박동절률감만,세포활력현저하강(P＜0.001),세포조망솔현저증고(P＜0.001),PKCε적표체차이무통계학의의(P＞0.05).여모형조비교,산조인총조감능사심기세포형태명현개선,현저제고세포활력、강저세포조망솔급승고PKCδ적표체,차이유통계학의의(P＜0.001).PKC억제제백굴채홍감가현저감약산조인총조감적보호작용,차이유통계학의의(P＜0.01).결론 산조인총조감대과양화경손상대서심기세포구유보호작용,기궤제가능여격활PKCε유관.
