中国呼吸与危重监护杂志
中國呼吸與危重鑑護雜誌
중국호흡여위중감호잡지
CHINESE JOURANL OF RESPIRATORY AND CRITICAL CARE MEDICINE
2013年
2期
158-162
,共5页
囊素五肽%肺纤维化%肺成纤维细胞%转化生长因子β1%Smad蛋白质类
囊素五肽%肺纖維化%肺成纖維細胞%轉化生長因子β1%Smad蛋白質類
낭소오태%폐섬유화%폐성섬유세포%전화생장인자β1%Smad단백질류
目的 观察囊素五肽(BP5)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激的人肺成纤维细胞分泌的细胞外基质以及对转化生长-β1/Smad信号通路的影响,探讨囊素五肽抗肺纤维化的机制.方法 HLF细胞分为阴性对照组、TGF-β1刺激组、TGF-β1+BP5药物干预组(三组均用TGF-β1刺激后分别使用不同浓度BP5 2.5、5及10 μg/ mL进行干预).免疫荧光法测定细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,Western blot方法检测collagen-Ⅰ、p-Smad2/3、p-Smad3和Smad7蛋白的表达.结果 TGF-β1刺激细胞经免疫荧光标记显示α-SMA阳性表达,说明人肺成纤维细胞在TGF-β1刺激下转化为肌成纤维细胞(MF),TGF-β1刺激同时加BP5不同药物浓度组中,10 μg/ mL的BP5药物浓度能显著减少细胞增殖转化.经TGF-β1刺激后,人肺成纤维细胞collagen-Ⅰ[(1.402±0.158)比(0.605±0.367)]、p-Smad2/3[(1.457±0.111)比(0.815 ±0.039)]、p-Smad3[(1.320±0.147)比(0.623±0.128)]蛋白表达较刺激前表达明显增多(P＜0.01),Smad7表达较对照组降低[(0.613 ±0.107)比(0.865±0.063),P＜0.05)]；与TGF-β1处理组相比,BP5可抑制由TGF-β1刺激人肺成纤维细胞引起的collagen-Ⅰ蛋白[(0.718 ±0.049)比(1.402±0.158)]、p-Smad2/3[(0.696±0.031)比(1.457±0.111)]p-Smad3[(0.766±0.006)比(1.320±0.147)]表达上调(P均＜0.01),而Smad7的蛋白表达明显增加[(1.237 ±0.173)比(0.614 ±0.107),P＜O.05].结论 BP5可能通过抑制TGF-β1/Smads信号通路激活,下调TGF-β1刺激下人肺成纤维细胞的collagen-Ⅰ及α-SMA蛋白的表达,提示BP5可能对肺纤维化具有一定的干预作用.
目的 觀察囊素五肽(BP5)對轉化生長因子β1(TGF-β1)刺激的人肺成纖維細胞分泌的細胞外基質以及對轉化生長-β1/Smad信號通路的影響,探討囊素五肽抗肺纖維化的機製.方法 HLF細胞分為陰性對照組、TGF-β1刺激組、TGF-β1+BP5藥物榦預組(三組均用TGF-β1刺激後分彆使用不同濃度BP5 2.5、5及10 μg/ mL進行榦預).免疫熒光法測定細胞α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的錶達,Western blot方法檢測collagen-Ⅰ、p-Smad2/3、p-Smad3和Smad7蛋白的錶達.結果 TGF-β1刺激細胞經免疫熒光標記顯示α-SMA暘性錶達,說明人肺成纖維細胞在TGF-β1刺激下轉化為肌成纖維細胞(MF),TGF-β1刺激同時加BP5不同藥物濃度組中,10 μg/ mL的BP5藥物濃度能顯著減少細胞增殖轉化.經TGF-β1刺激後,人肺成纖維細胞collagen-Ⅰ[(1.402±0.158)比(0.605±0.367)]、p-Smad2/3[(1.457±0.111)比(0.815 ±0.039)]、p-Smad3[(1.320±0.147)比(0.623±0.128)]蛋白錶達較刺激前錶達明顯增多(P＜0.01),Smad7錶達較對照組降低[(0.613 ±0.107)比(0.865±0.063),P＜0.05)]；與TGF-β1處理組相比,BP5可抑製由TGF-β1刺激人肺成纖維細胞引起的collagen-Ⅰ蛋白[(0.718 ±0.049)比(1.402±0.158)]、p-Smad2/3[(0.696±0.031)比(1.457±0.111)]p-Smad3[(0.766±0.006)比(1.320±0.147)]錶達上調(P均＜0.01),而Smad7的蛋白錶達明顯增加[(1.237 ±0.173)比(0.614 ±0.107),P＜O.05].結論 BP5可能通過抑製TGF-β1/Smads信號通路激活,下調TGF-β1刺激下人肺成纖維細胞的collagen-Ⅰ及α-SMA蛋白的錶達,提示BP5可能對肺纖維化具有一定的榦預作用.
목적 관찰낭소오태(BP5)대전화생장인자β1(TGF-β1)자격적인폐성섬유세포분비적세포외기질이급대전화생장-β1/Smad신호통로적영향,탐토낭소오태항폐섬유화적궤제.방법 HLF세포분위음성대조조、TGF-β1자격조、TGF-β1+BP5약물간예조(삼조균용TGF-β1자격후분별사용불동농도BP5 2.5、5급10 μg/ mL진행간예).면역형광법측정세포α평활기기동단백(α-SMA)적표체,Western blot방법검측collagen-Ⅰ、p-Smad2/3、p-Smad3화Smad7단백적표체.결과 TGF-β1자격세포경면역형광표기현시α-SMA양성표체,설명인폐성섬유세포재TGF-β1자격하전화위기성섬유세포(MF),TGF-β1자격동시가BP5불동약물농도조중,10 μg/ mL적BP5약물농도능현저감소세포증식전화.경TGF-β1자격후,인폐성섬유세포collagen-Ⅰ[(1.402±0.158)비(0.605±0.367)]、p-Smad2/3[(1.457±0.111)비(0.815 ±0.039)]、p-Smad3[(1.320±0.147)비(0.623±0.128)]단백표체교자격전표체명현증다(P＜0.01),Smad7표체교대조조강저[(0.613 ±0.107)비(0.865±0.063),P＜0.05)]；여TGF-β1처리조상비,BP5가억제유TGF-β1자격인폐성섬유세포인기적collagen-Ⅰ단백[(0.718 ±0.049)비(1.402±0.158)]、p-Smad2/3[(0.696±0.031)비(1.457±0.111)]p-Smad3[(0.766±0.006)비(1.320±0.147)]표체상조(P균＜0.01),이Smad7적단백표체명현증가[(1.237 ±0.173)비(0.614 ±0.107),P＜O.05].결론 BP5가능통과억제TGF-β1/Smads신호통로격활,하조TGF-β1자격하인폐성섬유세포적collagen-Ⅰ급α-SMA단백적표체,제시BP5가능대폐섬유화구유일정적간예작용.
