农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2013年
7期
828-837
,共10页
瞿韵%张宁%常璟%晋昕%文义凯%司怀军%王蒂
瞿韻%張寧%常璟%晉昕%文義凱%司懷軍%王蒂
구운%장저%상경%진흔%문의개%사부군%왕체
马铃薯%ST-LS1启动子%表达载体%转基因烟草
馬鈴藷%ST-LS1啟動子%錶達載體%轉基因煙草
마령서%ST-LS1계동자%표체재체%전기인연초
Potato%ST-LS1 promoter%Express vector%Transgenic tobacco
叶片是植物光合作用器官,在能量固定和利用中具有重要作用,研究光诱导型茎叶特异表达启动子的作用元件及其功能对于其调控基因的表达研究具有重要的理论意义和应用价值.本研究用PCR技术从马铃薯(Solanum tuberosum L.)基因组中分离了光诱导型茎叶特异表达启动子ST-LS1的1556 bp序列,序列分析表明,该片段与己报道的ST-LS1启动子(GenBank accession No.X04753.1)有99.68%的同源性,包括参与芽的特定表达和光反应顺式作用元件as-2-box、光效应顺式作用元件G-box等.将该片段与GUS基因融合,构建了植物表达载体pB I 121-ST-LS1,应用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化烟草(Nicotiana tabacum)获得了转基因植株.用qRT-PCR和GUS活性组织染色检测转基因烟草植株,结果表明,在ST-LS1启动子驱动的GUS转基因烟草植株的叶和茎中能够检测到GUS基因的表达,根中则检测不到;对黑暗、恒温光照培养、自然光条件处理20 d后的转基因植株分析表明,在黑暗处理的转基因植株中GUS基因无表达,而在自然光条件处理转基因植株的叶和茎中GUS基因的表达高于恒温光照培养的转基因植株.结果可为应用基因工程改良农作物品种提供理论和应用依据.
葉片是植物光閤作用器官,在能量固定和利用中具有重要作用,研究光誘導型莖葉特異錶達啟動子的作用元件及其功能對于其調控基因的錶達研究具有重要的理論意義和應用價值.本研究用PCR技術從馬鈴藷(Solanum tuberosum L.)基因組中分離瞭光誘導型莖葉特異錶達啟動子ST-LS1的1556 bp序列,序列分析錶明,該片段與己報道的ST-LS1啟動子(GenBank accession No.X04753.1)有99.68%的同源性,包括參與芽的特定錶達和光反應順式作用元件as-2-box、光效應順式作用元件G-box等.將該片段與GUS基因融閤,構建瞭植物錶達載體pB I 121-ST-LS1,應用根癌農桿菌(Agrobacterium tumefaciens)介導法轉化煙草(Nicotiana tabacum)穫得瞭轉基因植株.用qRT-PCR和GUS活性組織染色檢測轉基因煙草植株,結果錶明,在ST-LS1啟動子驅動的GUS轉基因煙草植株的葉和莖中能夠檢測到GUS基因的錶達,根中則檢測不到;對黑暗、恆溫光照培養、自然光條件處理20 d後的轉基因植株分析錶明,在黑暗處理的轉基因植株中GUS基因無錶達,而在自然光條件處理轉基因植株的葉和莖中GUS基因的錶達高于恆溫光照培養的轉基因植株.結果可為應用基因工程改良農作物品種提供理論和應用依據.
협편시식물광합작용기관,재능량고정화이용중구유중요작용,연구광유도형경협특이표체계동자적작용원건급기공능대우기조공기인적표체연구구유중요적이론의의화응용개치.본연구용PCR기술종마령서(Solanum tuberosum L.)기인조중분리료광유도형경협특이표체계동자ST-LS1적1556 bp서렬,서렬분석표명,해편단여기보도적ST-LS1계동자(GenBank accession No.X04753.1)유99.68%적동원성,포괄삼여아적특정표체화광반응순식작용원건as-2-box、광효응순식작용원건G-box등.장해편단여GUS기인융합,구건료식물표체재체pB I 121-ST-LS1,응용근암농간균(Agrobacterium tumefaciens)개도법전화연초(Nicotiana tabacum)획득료전기인식주.용qRT-PCR화GUS활성조직염색검측전기인연초식주,결과표명,재ST-LS1계동자구동적GUS전기인연초식주적협화경중능구검측도GUS기인적표체,근중칙검측불도;대흑암、항온광조배양、자연광조건처리20 d후적전기인식주분석표명,재흑암처리적전기인식주중GUS기인무표체,이재자연광조건처리전기인식주적협화경중GUS기인적표체고우항온광조배양적전기인식주.결과가위응용기인공정개량농작물품충제공이론화응용의거.