农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2013年
7期
820-827
,共8页
许兰珍%何永睿%彭爱红%雷天刚%刘小丰%邹修平%姚利晓%陈善春
許蘭珍%何永睿%彭愛紅%雷天剛%劉小豐%鄒脩平%姚利曉%陳善春
허란진%하영예%팽애홍%뢰천강%류소봉%추수평%요리효%진선춘
柑橘%ShivaA基因%抗菌肽%遗传稳定性
柑橘%ShivaA基因%抗菌肽%遺傳穩定性
감귤%ShivaA기인%항균태%유전은정성
Citrus%Shiva A gene%Antibacterial peptides%Genetic stability
为进一步明确外源基因在转基因柑橘无性繁殖后代中的遗传稳定性及目标性状表现,本研究以转双价抗菌肽基因(ShivaA-cecropinB)纽荷尔脐橙(Citrus Sinensis Osbeck)无性繁殖后代植株为材料,通过PCR扩增,Southern杂交和实时定量PCR检测,以及温室抗病性评价分析等,对抗菌肽ShivaA基因在转基因柑橘后代株系中的遗传稳定性进行了研究.结果表明,外源抗菌肽Shiva A基因在转基因及其无性后代中能够稳定整合与表达.Southern杂交分析表明,ShivaA基因在无性繁殖后代基因组中为1个拷贝,而在T0代中为2个拷贝,由此推测T0代植株为混合嵌合体.定量PCR分析表明,ShivaA基因在To代中的表达水平低于其无性繁殖后代.本研究中外源基因的表达与拷贝数的多少成负相关.研究结果为开展转基因柑橘安全性评价提供了有用的实验材料,积累了有效的实验数据.
為進一步明確外源基因在轉基因柑橘無性繁殖後代中的遺傳穩定性及目標性狀錶現,本研究以轉雙價抗菌肽基因(ShivaA-cecropinB)紐荷爾臍橙(Citrus Sinensis Osbeck)無性繁殖後代植株為材料,通過PCR擴增,Southern雜交和實時定量PCR檢測,以及溫室抗病性評價分析等,對抗菌肽ShivaA基因在轉基因柑橘後代株繫中的遺傳穩定性進行瞭研究.結果錶明,外源抗菌肽Shiva A基因在轉基因及其無性後代中能夠穩定整閤與錶達.Southern雜交分析錶明,ShivaA基因在無性繁殖後代基因組中為1箇拷貝,而在T0代中為2箇拷貝,由此推測T0代植株為混閤嵌閤體.定量PCR分析錶明,ShivaA基因在To代中的錶達水平低于其無性繁殖後代.本研究中外源基因的錶達與拷貝數的多少成負相關.研究結果為開展轉基因柑橘安全性評價提供瞭有用的實驗材料,積纍瞭有效的實驗數據.
위진일보명학외원기인재전기인감귤무성번식후대중적유전은정성급목표성상표현,본연구이전쌍개항균태기인(ShivaA-cecropinB)뉴하이제등(Citrus Sinensis Osbeck)무성번식후대식주위재료,통과PCR확증,Southern잡교화실시정량PCR검측,이급온실항병성평개분석등,대항균태ShivaA기인재전기인감귤후대주계중적유전은정성진행료연구.결과표명,외원항균태Shiva A기인재전기인급기무성후대중능구은정정합여표체.Southern잡교분석표명,ShivaA기인재무성번식후대기인조중위1개고패,이재T0대중위2개고패,유차추측T0대식주위혼합감합체.정량PCR분석표명,ShivaA기인재To대중적표체수평저우기무성번식후대.본연구중외원기인적표체여고패수적다소성부상관.연구결과위개전전기인감귤안전성평개제공료유용적실험재료,적루료유효적실험수거.
