标记免疫分析与临床
標記免疫分析與臨床
표기면역분석여림상
LABELED IMMUNOASSAYS AND CLINICAL MEDICINE
2013年
3期
164-168
,共5页
王瑶%李建福%罗锦花%赵青%付小兵
王瑤%李建福%囉錦花%趙青%付小兵
왕요%리건복%라금화%조청%부소병
表皮干细胞%基质细胞衍生因子-1%细胞增殖%免疫组化%免疫荧光染色%RT-PCR检测
錶皮榦細胞%基質細胞衍生因子-1%細胞增殖%免疫組化%免疫熒光染色%RT-PCR檢測
표피간세포%기질세포연생인자-1%세포증식%면역조화%면역형광염색%RT-PCR검측
Epidermal stem cells%Stromal cell-derived factor-1%Cell proliferation%Immunohistochemistry%Immunofluorescence%RT-PCR
目的 了解基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在体外对表皮干细胞(ESCs)生长增殖的促进作用,为创面促愈药物研发提供理论依据.方法 体外分离、培养ESCs,通过ESCs的免疫组化、免疫荧光染色对ESCs进行鉴定;RT-PCR检测ESCs中基质细胞衍生因子-1受体(CXCR4)基因的表达;取培养至第三代的ESCs分组,通过台盼蓝拒染实验、Edu标记法观察在不同剂量SDF-1的刺激作用和CXCR4拮抗剂存在下,A~E组及A’~E’组间ESCs生长增殖的差异.结果 应用特制的ESCs培养基能培养出活力强、纯度高的ESCs;培养的ESCs表达K19、CD29、integrinα6,不表达CD71;CXCR4基因在ESCs中阳性表达;体外细胞实验证实SDF-1对ESCs有促进增殖作用,SDF-1浓度为100μg/L时作用最强,差异有统计学意义(P<0.01);CXCR4拮抗剂AMD3100存在时,SDF-1对ESCs的促增殖作用失效.结论 SDF-1对体外培养扩增的ESCs有促进增殖作用;SDF-1合理应用,有可能在皮肤治疗中发挥促愈作用.
目的 瞭解基質細胞衍生因子-1(SDF-1)在體外對錶皮榦細胞(ESCs)生長增殖的促進作用,為創麵促愈藥物研髮提供理論依據.方法 體外分離、培養ESCs,通過ESCs的免疫組化、免疫熒光染色對ESCs進行鑒定;RT-PCR檢測ESCs中基質細胞衍生因子-1受體(CXCR4)基因的錶達;取培養至第三代的ESCs分組,通過檯盼藍拒染實驗、Edu標記法觀察在不同劑量SDF-1的刺激作用和CXCR4拮抗劑存在下,A~E組及A’~E’組間ESCs生長增殖的差異.結果 應用特製的ESCs培養基能培養齣活力彊、純度高的ESCs;培養的ESCs錶達K19、CD29、integrinα6,不錶達CD71;CXCR4基因在ESCs中暘性錶達;體外細胞實驗證實SDF-1對ESCs有促進增殖作用,SDF-1濃度為100μg/L時作用最彊,差異有統計學意義(P<0.01);CXCR4拮抗劑AMD3100存在時,SDF-1對ESCs的促增殖作用失效.結論 SDF-1對體外培養擴增的ESCs有促進增殖作用;SDF-1閤理應用,有可能在皮膚治療中髮揮促愈作用.
목적 료해기질세포연생인자-1(SDF-1)재체외대표피간세포(ESCs)생장증식적촉진작용,위창면촉유약물연발제공이론의거.방법 체외분리、배양ESCs,통과ESCs적면역조화、면역형광염색대ESCs진행감정;RT-PCR검측ESCs중기질세포연생인자-1수체(CXCR4)기인적표체;취배양지제삼대적ESCs분조,통과태반람거염실험、Edu표기법관찰재불동제량SDF-1적자격작용화CXCR4길항제존재하,A~E조급A’~E’조간ESCs생장증식적차이.결과 응용특제적ESCs배양기능배양출활력강、순도고적ESCs;배양적ESCs표체K19、CD29、integrinα6,불표체CD71;CXCR4기인재ESCs중양성표체;체외세포실험증실SDF-1대ESCs유촉진증식작용,SDF-1농도위100μg/L시작용최강,차이유통계학의의(P<0.01);CXCR4길항제AMD3100존재시,SDF-1대ESCs적촉증식작용실효.결론 SDF-1대체외배양확증적ESCs유촉진증식작용;SDF-1합리응용,유가능재피부치료중발휘촉유작용.