临床肿瘤学杂志
臨床腫瘤學雜誌
림상종류학잡지
CHINESE CLINICAL ONCOLOGY
2013年
6期
481-485
,共5页
吴魏芹%张晓媛%徐海凤%徐静%沈捷%卢凯华
吳魏芹%張曉媛%徐海鳳%徐靜%瀋捷%盧凱華
오위근%장효원%서해봉%서정%침첩%로개화
死亡相关蛋白激酶%表皮生长因子受体%吉非替尼%DNA甲基化%非小细胞肺癌%细胞株
死亡相關蛋白激酶%錶皮生長因子受體%吉非替尼%DNA甲基化%非小細胞肺癌%細胞株
사망상관단백격매%표피생장인자수체%길비체니%DNA갑기화%비소세포폐암%세포주
Death associated protein kinase (DAPK)%EGFR%Gefitinib%DNA methylation%Non-small cell lung cancer%Cell lines
目的 探讨死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因启动子区域甲基化对非小细胞肺癌(NSC LC)细胞株中表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)敏感性的影响.方法 采用不同浓度吉非替尼作用2株EGFR外显子19缺失突变型(H 1650、PC9)和2株EGFR野生型(A549、H520) NSCLC细胞.5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-CdR)去甲基化处理,用CCK-8法检测细胞增殖率,流式细胞技术检测细胞凋亡率,荧光定量PCR法检测DAPK mRNA表达情况,甲基化特异性PCR(MSP)法检测DAPK启动子区甲基化状态.结果 吉非替尼对4种细胞株均存在不同程度的增殖抑制作用,呈浓度依赖性.5-aza-CdR去甲基化后,H1650细胞及H520细胞对吉非替尼的敏感性较前增强(P＜0.05)；流式细胞仪检测显示,H1650、H520细胞凋亡率上升较明显(P＜0.05).未经5-aza-CdR处理的细胞株中,吉非替尼敏感型的PC9、A549细胞株存在DAPK mRNA高表达,其基因启动子处于非甲基化状态；吉非替尼耐药型的H1650、H520细胞株DAPK mRNA表达水平较低,DAPK启动子处于高甲基化状态.5-aza-CdR去除H1650及H520细胞的DAPK基因启动子区甲基化后,DAPK基因表达及对吉非替尼的敏感性较前显著升高(P＜0.05)；而吉非替尼敏感的PC9及A549细胞株经5-aza-CdR处理后未见明显改变(P＞0.05).结论 抑癌基因DAPK启动子区域的高甲基化能够下调DAPK基因的表达,从而降低NSCLC对吉非替尼的敏感性.对DAPK基因进行甲基化状态检测,可能为临床上预测吉非替尼疗效提供新的手段.
目的 探討死亡相關蛋白激酶(DAPK)基因啟動子區域甲基化對非小細胞肺癌(NSC LC)細胞株中錶皮生長因子酪氨痠激酶抑製劑(EGFR-TKI)敏感性的影響.方法 採用不同濃度吉非替尼作用2株EGFR外顯子19缺失突變型(H 1650、PC9)和2株EGFR野生型(A549、H520) NSCLC細胞.5-氮雜-2’-脫氧胞苷(5-aza-CdR)去甲基化處理,用CCK-8法檢測細胞增殖率,流式細胞技術檢測細胞凋亡率,熒光定量PCR法檢測DAPK mRNA錶達情況,甲基化特異性PCR(MSP)法檢測DAPK啟動子區甲基化狀態.結果 吉非替尼對4種細胞株均存在不同程度的增殖抑製作用,呈濃度依賴性.5-aza-CdR去甲基化後,H1650細胞及H520細胞對吉非替尼的敏感性較前增彊(P＜0.05)；流式細胞儀檢測顯示,H1650、H520細胞凋亡率上升較明顯(P＜0.05).未經5-aza-CdR處理的細胞株中,吉非替尼敏感型的PC9、A549細胞株存在DAPK mRNA高錶達,其基因啟動子處于非甲基化狀態；吉非替尼耐藥型的H1650、H520細胞株DAPK mRNA錶達水平較低,DAPK啟動子處于高甲基化狀態.5-aza-CdR去除H1650及H520細胞的DAPK基因啟動子區甲基化後,DAPK基因錶達及對吉非替尼的敏感性較前顯著升高(P＜0.05)；而吉非替尼敏感的PC9及A549細胞株經5-aza-CdR處理後未見明顯改變(P＞0.05).結論 抑癌基因DAPK啟動子區域的高甲基化能夠下調DAPK基因的錶達,從而降低NSCLC對吉非替尼的敏感性.對DAPK基因進行甲基化狀態檢測,可能為臨床上預測吉非替尼療效提供新的手段.
목적 탐토사망상관단백격매(DAPK)기인계동자구역갑기화대비소세포폐암(NSC LC)세포주중표피생장인자락안산격매억제제(EGFR-TKI)민감성적영향.방법 채용불동농도길비체니작용2주EGFR외현자19결실돌변형(H 1650、PC9)화2주EGFR야생형(A549、H520) NSCLC세포.5-담잡-2’-탈양포감(5-aza-CdR)거갑기화처리,용CCK-8법검측세포증식솔,류식세포기술검측세포조망솔,형광정량PCR법검측DAPK mRNA표체정황,갑기화특이성PCR(MSP)법검측DAPK계동자구갑기화상태.결과 길비체니대4충세포주균존재불동정도적증식억제작용,정농도의뢰성.5-aza-CdR거갑기화후,H1650세포급H520세포대길비체니적민감성교전증강(P＜0.05)；류식세포의검측현시,H1650、H520세포조망솔상승교명현(P＜0.05).미경5-aza-CdR처리적세포주중,길비체니민감형적PC9、A549세포주존재DAPK mRNA고표체,기기인계동자처우비갑기화상태；길비체니내약형적H1650、H520세포주DAPK mRNA표체수평교저,DAPK계동자처우고갑기화상태.5-aza-CdR거제H1650급H520세포적DAPK기인계동자구갑기화후,DAPK기인표체급대길비체니적민감성교전현저승고(P＜0.05)；이길비체니민감적PC9급A549세포주경5-aza-CdR처리후미견명현개변(P＞0.05).결론 억암기인DAPK계동자구역적고갑기화능구하조DAPK기인적표체,종이강저NSCLC대길비체니적민감성.대DAPK기인진행갑기화상태검측,가능위림상상예측길비체니료효제공신적수단.
