畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2013年
7期
36-39
,共4页
庞春英%杨炳壮%王建%梁贤威%邓廷贤
龐春英%楊炳壯%王建%樑賢威%鄧廷賢
방춘영%양병장%왕건%량현위%산정현
实时荧光定量PCR%水牛%Fat-1基因%基因拷贝数
實時熒光定量PCR%水牛%Fat-1基因%基因拷貝數
실시형광정량PCR%수우%Fat-1기인%기인고패수
荧光定量PCR是近些年发展起来的一项新技术,可用于检测外源基因的整合拷贝数、临床诊断、食品安全和动物疾病检测等领域,具有广阔的应用前景.本文构建了携带Fat-1基因的标准品质粒,以SYBR Green为荧光染料,进行实时荧光定量PCR反应,建立标准曲线,并结合绝对定量法检测Fat-1基因在水牛耳缘和肾脏成纤维细胞基因组中的整合拷贝数.结果表明,转Fat-1基因的水牛体细胞的Ct值与起始拷贝数对数的回归方程为:y=-3.43x+31.01,R2为0.998 7,反应效率为99.5％,具有良好的重复性.本文建立的这种高效检测水牛体细胞基因组中外源基因拷贝数的方法,为后期转Fat-1基因水牛的表达分析和检测等研究奠定基础.
熒光定量PCR是近些年髮展起來的一項新技術,可用于檢測外源基因的整閤拷貝數、臨床診斷、食品安全和動物疾病檢測等領域,具有廣闊的應用前景.本文構建瞭攜帶Fat-1基因的標準品質粒,以SYBR Green為熒光染料,進行實時熒光定量PCR反應,建立標準麯線,併結閤絕對定量法檢測Fat-1基因在水牛耳緣和腎髒成纖維細胞基因組中的整閤拷貝數.結果錶明,轉Fat-1基因的水牛體細胞的Ct值與起始拷貝數對數的迴歸方程為:y=-3.43x+31.01,R2為0.998 7,反應效率為99.5％,具有良好的重複性.本文建立的這種高效檢測水牛體細胞基因組中外源基因拷貝數的方法,為後期轉Fat-1基因水牛的錶達分析和檢測等研究奠定基礎.
형광정량PCR시근사년발전기래적일항신기술,가용우검측외원기인적정합고패수、림상진단、식품안전화동물질병검측등영역,구유엄활적응용전경.본문구건료휴대Fat-1기인적표준품질립,이SYBR Green위형광염료,진행실시형광정량PCR반응,건립표준곡선,병결합절대정량법검측Fat-1기인재수우이연화신장성섬유세포기인조중적정합고패수.결과표명,전Fat-1기인적수우체세포적Ct치여기시고패수대수적회귀방정위:y=-3.43x+31.01,R2위0.998 7,반응효솔위99.5％,구유량호적중복성.본문건립적저충고효검측수우체세포기인조중외원기인고패수적방법,위후기전Fat-1기인수우적표체분석화검측등연구전정기출.
