温州医学院学报
溫州醫學院學報
온주의학원학보
JOURNAL OF WENZHOU MEDICAL COLLEGE
2013年
7期
421-425
,共5页
朱慧萍%苏震%周宏伟%章慧娣%黄朝兴
硃慧萍%囌震%週宏偉%章慧娣%黃朝興
주혜평%소진%주굉위%장혜제%황조흥
肾间质纤维化%microRNA-132%转化生长因子β1
腎間質纖維化%microRNA-132%轉化生長因子β1
신간질섬유화%microRNA-132%전화생장인자β1
renal interstitial fibrosis%microRNA-132%transforming growth factor-β1
目的:探讨microRNA-132 (miR-132)对转化生长因子(transforming growth factor,TGF)β1刺激后大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)的细胞外基质分泌的调控作用.方法:体外培养NRK-49F细胞株,经TGF-β1 (2、3、5 ng/mL)作用24 h,或细胞转染miR-132模拟物(rno-miR-132 mimics,50 ng/mL)作用24 h,或rno-miR-132 mimics与TGF-β1共同作用24 h,茎环实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)法检测细胞miR-132表达,RT-qPCR法和Western Blot法分别检测细胞胶原蛋白Ⅰ(Collagen Ⅰ,Co1 Ⅰ)mRNA和蛋白表达.结果:①不同浓度TGF-β1刺激后NRK-49F细胞miR-132和Co1 Ⅰ的表达显著升高(P＜0.01).②rno-miR-132 mimics (50 ng/mL)作用NRK-49F细胞Co1 Ⅰ表达显著升高(P＜0.01).③与TGF-β1 (3 ng/mL)阳性对照组相比,rno-miR-132 mimics (50 ng/mL)与TGF-β1 (3 ng/mL)共同作用NRK-49F细胞Co1 Ⅰ表达显著升高(P＜0.01).结论:miR-132可以促进TGF-β1诱导的NRK-49F细胞分泌细胞外基质.
目的:探討microRNA-132 (miR-132)對轉化生長因子(transforming growth factor,TGF)β1刺激後大鼠腎間質成纖維細胞(NRK-49F)的細胞外基質分泌的調控作用.方法:體外培養NRK-49F細胞株,經TGF-β1 (2、3、5 ng/mL)作用24 h,或細胞轉染miR-132模擬物(rno-miR-132 mimics,50 ng/mL)作用24 h,或rno-miR-132 mimics與TGF-β1共同作用24 h,莖環實時熒光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)法檢測細胞miR-132錶達,RT-qPCR法和Western Blot法分彆檢測細胞膠原蛋白Ⅰ(Collagen Ⅰ,Co1 Ⅰ)mRNA和蛋白錶達.結果:①不同濃度TGF-β1刺激後NRK-49F細胞miR-132和Co1 Ⅰ的錶達顯著升高(P＜0.01).②rno-miR-132 mimics (50 ng/mL)作用NRK-49F細胞Co1 Ⅰ錶達顯著升高(P＜0.01).③與TGF-β1 (3 ng/mL)暘性對照組相比,rno-miR-132 mimics (50 ng/mL)與TGF-β1 (3 ng/mL)共同作用NRK-49F細胞Co1 Ⅰ錶達顯著升高(P＜0.01).結論:miR-132可以促進TGF-β1誘導的NRK-49F細胞分泌細胞外基質.
목적:탐토microRNA-132 (miR-132)대전화생장인자(transforming growth factor,TGF)β1자격후대서신간질성섬유세포(NRK-49F)적세포외기질분비적조공작용.방법:체외배양NRK-49F세포주,경TGF-β1 (2、3、5 ng/mL)작용24 h,혹세포전염miR-132모의물(rno-miR-132 mimics,50 ng/mL)작용24 h,혹rno-miR-132 mimics여TGF-β1공동작용24 h,경배실시형광정량PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)법검측세포miR-132표체,RT-qPCR법화Western Blot법분별검측세포효원단백Ⅰ(Collagen Ⅰ,Co1 Ⅰ)mRNA화단백표체.결과:①불동농도TGF-β1자격후NRK-49F세포miR-132화Co1 Ⅰ적표체현저승고(P＜0.01).②rno-miR-132 mimics (50 ng/mL)작용NRK-49F세포Co1 Ⅰ표체현저승고(P＜0.01).③여TGF-β1 (3 ng/mL)양성대조조상비,rno-miR-132 mimics (50 ng/mL)여TGF-β1 (3 ng/mL)공동작용NRK-49F세포Co1 Ⅰ표체현저승고(P＜0.01).결론:miR-132가이촉진TGF-β1유도적NRK-49F세포분비세포외기질.
