中国比较医学杂志
中國比較醫學雜誌
중국비교의학잡지
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
2013年
6期
58-62,后插8-后插9
,共6页
马雪梅%张群%庞国进%丛敏
馬雪梅%張群%龐國進%叢敏
마설매%장군%방국진%총민
腺相关病毒%慢病毒%小干扰RNA%金属蛋白酶组织抑制因子-1%大鼠
腺相關病毒%慢病毒%小榦擾RNA%金屬蛋白酶組織抑製因子-1%大鼠
선상관병독%만병독%소간우RNA%금속단백매조직억제인자-1%대서
Adeno-associated virus (AAV)%Lentivirus%Small interfering RNA (siRNA)%Tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1)%Rat
目的 观察以腺相关病毒(AAV)及慢病毒(Lentivirus)为载体含有针对大鼠金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1具有较强抑制作用的小干扰RNA(siRNA)对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化模型的干预作用.方法 挑选针对大鼠TIMP-1基因具有较强抑制作用的siRNA序列,在体外构建为短发夹表达载体后,将其包装为重组AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1,同时包装对照病毒AAV/EGFP和Lenti/EGFP.将Wistar大鼠分为对照组、CC14模型组、AAV/EGFP组、Lenti/EGFP组、AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1组,观察CCl4造模4周后,经H&E及Masson染色评价各组动物的肝纤维化状况,经荧光定量RCR及Western blot方法检测TIMP-1的表达抑制情况.结果 H&E及Masson染色证实,与对照组相比,CCl4模型组、AAV/EGFP组、Lenti/EGFP组肝脏胶原纤维明显增加,纤维化评分多为3-4级,同时肝脏TIMP-1的转录与蛋白表达水平均明显上升；而AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1组肝纤维化程度明显减轻,纤维化评分多为2-3级,伴随肝脏TIMP-1的转录与蛋白表达水平均显著抑制.AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1组在组织学表现及TIMP-1基因的转录与表达水平上无统计学差异.结论 AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1均可有效抑制大鼠肝脏TIMP-1基因表达,进而发挥抗肝纤维化作用.
目的 觀察以腺相關病毒(AAV)及慢病毒(Lentivirus)為載體含有針對大鼠金屬蛋白酶組織抑製因子(TIMP)-1具有較彊抑製作用的小榦擾RNA(siRNA)對四氯化碳(CCl4)誘導的大鼠肝纖維化模型的榦預作用.方法 挑選針對大鼠TIMP-1基因具有較彊抑製作用的siRNA序列,在體外構建為短髮夾錶達載體後,將其包裝為重組AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1,同時包裝對照病毒AAV/EGFP和Lenti/EGFP.將Wistar大鼠分為對照組、CC14模型組、AAV/EGFP組、Lenti/EGFP組、AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1組,觀察CCl4造模4週後,經H&E及Masson染色評價各組動物的肝纖維化狀況,經熒光定量RCR及Western blot方法檢測TIMP-1的錶達抑製情況.結果 H&E及Masson染色證實,與對照組相比,CCl4模型組、AAV/EGFP組、Lenti/EGFP組肝髒膠原纖維明顯增加,纖維化評分多為3-4級,同時肝髒TIMP-1的轉錄與蛋白錶達水平均明顯上升；而AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1組肝纖維化程度明顯減輕,纖維化評分多為2-3級,伴隨肝髒TIMP-1的轉錄與蛋白錶達水平均顯著抑製.AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1組在組織學錶現及TIMP-1基因的轉錄與錶達水平上無統計學差異.結論 AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1均可有效抑製大鼠肝髒TIMP-1基因錶達,進而髮揮抗肝纖維化作用.
목적 관찰이선상관병독(AAV)급만병독(Lentivirus)위재체함유침대대서금속단백매조직억제인자(TIMP)-1구유교강억제작용적소간우RNA(siRNA)대사록화탄(CCl4)유도적대서간섬유화모형적간예작용.방법 도선침대대서TIMP-1기인구유교강억제작용적siRNA서렬,재체외구건위단발협표체재체후,장기포장위중조AAV/siRNA-TIMP-1화Lenti/siRNA-TIMP-1,동시포장대조병독AAV/EGFP화Lenti/EGFP.장Wistar대서분위대조조、CC14모형조、AAV/EGFP조、Lenti/EGFP조、AAV/siRNA-TIMP-1화Lenti/siRNA-TIMP-1조,관찰CCl4조모4주후,경H&E급Masson염색평개각조동물적간섬유화상황,경형광정량RCR급Western blot방법검측TIMP-1적표체억제정황.결과 H&E급Masson염색증실,여대조조상비,CCl4모형조、AAV/EGFP조、Lenti/EGFP조간장효원섬유명현증가,섬유화평분다위3-4급,동시간장TIMP-1적전록여단백표체수평균명현상승；이AAV/siRNA-TIMP-1화Lenti/siRNA-TIMP-1조간섬유화정도명현감경,섬유화평분다위2-3급,반수간장TIMP-1적전록여단백표체수평균현저억제.AAV/siRNA-TIMP-1화Lenti/siRNA-TIMP-1조재조직학표현급TIMP-1기인적전록여표체수평상무통계학차이.결론 AAV/siRNA-TIMP-1화Lenti/siRNA-TIMP-1균가유효억제대서간장TIMP-1기인표체,진이발휘항간섬유화작용.
