广西科学
廣西科學
엄서과학
GUANGXI SCIENCES
2014年
1期
28-33
,共6页
陈雅娟%董园%芦志龙%陈东%黄日波
陳雅娟%董園%蘆誌龍%陳東%黃日波
진아연%동완%호지룡%진동%황일파
纤维素酶%琼斯氏菌%酶学性质
纖維素酶%瓊斯氏菌%酶學性質
섬유소매%경사씨균%매학성질
cellulase%Jonesia sp.%enzymatic properties
[目的]从堆肥中筛选和鉴定产碱性纤维素酶的菌株,对菌株及其酶学特性进行研究.[方法]以刚果红平板染色法进行初筛,摇瓶发酵复筛,分离到高酶活菌株C73.通过形态观察和16S rRNA序列分析对菌株进行鉴定.采用DNS定糖法测定发酵液酶活最适pH值、pH值稳定性、最适温度、热稳定性及常见金属离子、SDS、EDTA等对酶活的影响.[结果]该菌株形态呈杆状,革兰氏阳性,不产芽孢,适宜在pH值8.0~11.0、30~37℃条件下生长.16S rRNA序列比对发现,该菌株与琼斯氏菌(Jonesia sp.)PC1序列相似度大于99%,初步鉴定为琼斯氏菌属菌株.在发酵培养基中,菌体浓度和CMCase活力分别在40h和50h达到最大值,随着发酵时间的延长发酵液pH值稳定在9.5左右.粗酶液的最适作用pH值为10.0,此时CMCase活力达2.3U/mL.在pH值8.0~11.0的范围内保持60%以上的酶活;最适作用温度为60℃,且在30~80℃的范围内保持60%以上的酶活.金属离子Mn2+、Co2+和(NH4)2SO4对酶活力有较强的抑制作用.[结论]菌株C73呈现较高的碱性CMCase酶活、较高的热稳定性和pH值稳定性,具有良好的工业应用前景.
[目的]從堆肥中篩選和鑒定產堿性纖維素酶的菌株,對菌株及其酶學特性進行研究.[方法]以剛果紅平闆染色法進行初篩,搖瓶髮酵複篩,分離到高酶活菌株C73.通過形態觀察和16S rRNA序列分析對菌株進行鑒定.採用DNS定糖法測定髮酵液酶活最適pH值、pH值穩定性、最適溫度、熱穩定性及常見金屬離子、SDS、EDTA等對酶活的影響.[結果]該菌株形態呈桿狀,革蘭氏暘性,不產芽孢,適宜在pH值8.0~11.0、30~37℃條件下生長.16S rRNA序列比對髮現,該菌株與瓊斯氏菌(Jonesia sp.)PC1序列相似度大于99%,初步鑒定為瓊斯氏菌屬菌株.在髮酵培養基中,菌體濃度和CMCase活力分彆在40h和50h達到最大值,隨著髮酵時間的延長髮酵液pH值穩定在9.5左右.粗酶液的最適作用pH值為10.0,此時CMCase活力達2.3U/mL.在pH值8.0~11.0的範圍內保持60%以上的酶活;最適作用溫度為60℃,且在30~80℃的範圍內保持60%以上的酶活.金屬離子Mn2+、Co2+和(NH4)2SO4對酶活力有較彊的抑製作用.[結論]菌株C73呈現較高的堿性CMCase酶活、較高的熱穩定性和pH值穩定性,具有良好的工業應用前景.
[목적]종퇴비중사선화감정산감성섬유소매적균주,대균주급기매학특성진행연구.[방법]이강과홍평판염색법진행초사,요병발효복사,분리도고매활균주C73.통과형태관찰화16S rRNA서렬분석대균주진행감정.채용DNS정당법측정발효액매활최괄pH치、pH치은정성、최괄온도、열은정성급상견금속리자、SDS、EDTA등대매활적영향.[결과]해균주형태정간상,혁란씨양성,불산아포,괄의재pH치8.0~11.0、30~37℃조건하생장.16S rRNA서렬비대발현,해균주여경사씨균(Jonesia sp.)PC1서렬상사도대우99%,초보감정위경사씨균속균주.재발효배양기중,균체농도화CMCase활력분별재40h화50h체도최대치,수착발효시간적연장발효액pH치은정재9.5좌우.조매액적최괄작용pH치위10.0,차시CMCase활력체2.3U/mL.재pH치8.0~11.0적범위내보지60%이상적매활;최괄작용온도위60℃,차재30~80℃적범위내보지60%이상적매활.금속리자Mn2+、Co2+화(NH4)2SO4대매활력유교강적억제작용.[결론]균주C73정현교고적감성CMCase매활、교고적열은정성화pH치은정성,구유량호적공업응용전경.