CAJ | 학술논문

现有的动物疫病诊断技术多是针对单一病原进行的,而动物疫病的流行却出现了多种病毒混合感染,现有诊断技术不能很好地满足国境口岸快速、高通量检疫的需求,动物疫病多重检测新技术的研究近来已经成为动物疫情监测、疫病控制领域关注的焦点.本研究利用多重连接探针扩增(MLPA)技术特异、敏感、高通量等技术优势,以猪流感病毒(SIV)、伪狂犬病病毒(PRV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪传染性胃肠炎(TGEV)和猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)为研究对象,分别设计了这5种病毒的MLPA探针,将这5种探针混合,建立了可以同时检测这5种病毒的MLPA扩增方法.方法特异性试验表明,针对每种病毒的探针都只能扩增出其对应的病毒模板,其余病毒模板的扩增都是阴性结果；而且,5种探针混合物都只能从单个目的病毒中扩增出单一的特异性条带,而猪细小病毒(PPV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的扩增均为阴性.敏感性试验结果表明,5重MLPA扩增的最低检测限可以达到单个病毒核酸3000～6000个拷贝.本研究建立的5种病毒MLPA检测方法在国内外首次实现一次采样,一次分析,检测5种猪病的目的,该技术特异性强,敏感性高,加之其多重性检测优势,有望成为未来疫病检测的新方向.
현유적동물역병진단기술다시침대단일병원진행적,이동물역병적류행각출현료다충병독혼합감염,현유진단기술불능흔호지만족국경구안쾌속、고통량검역적수구,동물역병다중검측신기술적연구근래이경성위동물역정감측、역병공제영역관주적초점.본연구이용다중련접탐침확증(MLPA)기술특이、민감、고통량등기술우세,이저류감병독(SIV)、위광견병병독(PRV)、구제역병독(FMDV)、저전염성위장염(TGEV)화저번식여호흡종합증병독(PRRSV)위연구대상,분별설계료저5충병독적MLPA탐침,장저5충탐침혼합,건립료가이동시검측저5충병독적MLPA확증방법.방법특이성시험표명,침대매충병독적탐침도지능확증출기대응적병독모판,기여병독모판적확증도시음성결과；이차,5충탐침혼합물도지능종단개목적병독중확증출단일적특이성조대,이저세소병독(PPV)、저온병독(CSFV)화저류행성복사병독(PEDV)적확증균위음성.민감성시험결과표명,5중MLPA확증적최저검측한가이체도단개병독핵산3000～6000개고패.본연구건립적5충병독MLPA검측방법재국내외수차실현일차채양,일차분석,검측5충저병적목적,해기술특이성강,민감성고,가지기다중성검측우세,유망성위미래역병검측적신방향.