CAJ | 학술논문

睡美人(sleeping beauty,SB)是Tc1/mariner转座子超家族的一员,为探索睡美人转座子与不同的转座酶搭配使用及与同种转座酶不同比例搭配使用时的转座效率,本实验构建了SB真核表达重组载体PT2-SV40-EGFP,通过荧光显微镜和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测进行了猪胎儿成纤维细胞系(PEFs)转染条件优化研究.研究结果表明,不同转座酶与转座子按10∶1混合后细胞转染效率相似,但报告基因表达水平有较大差异,其中SB 100X转座酶与转座子混合后细胞的表达水平最高；转座子PT2-SV40-EGFP质粒和SB 100X转座酶质粒按不同比例混合转染细胞研究表明,细胞转染效率相似,但表达水平存在显著差异,其中1∶1组最高,约是5∶1组和10∶1组的50倍.本实验优化了睡美人转座子的转座条件为制备转基因动物深入研究提供参考.
수미인(sleeping beauty,SB)시Tc1/mariner전좌자초가족적일원,위탐색수미인전좌자여불동적전좌매탑배사용급여동충전좌매불동비례탑배사용시적전좌효솔,본실험구건료SB진핵표체중조재체PT2-SV40-EGFP,통과형광현미경화실시형광정량PCR(qRT-PCR)검측진행료저태인성섬유세포계(PEFs)전염조건우화연구.연구결과표명,불동전좌매여전좌자안10∶1혼합후세포전염효솔상사,단보고기인표체수평유교대차이,기중SB 100X전좌매여전좌자혼합후세포적표체수평최고；전좌자PT2-SV40-EGFP질립화SB 100X전좌매질립안불동비례혼합전염세포연구표명,세포전염효솔상사,단표체수평존재현저차이,기중1∶1조최고,약시5∶1조화10∶1조적50배.본실험우화료수미인전좌자적전좌조건위제비전기인동물심입연구제공삼고.