中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2013年
5期
534-537,541
,共5页
mTOR%shRNA%慢病毒载体
mTOR%shRNA%慢病毒載體
mTOR%shRNA%만병독재체
mTOR%shRNA%Lentivirus-vector
目的:构建mTORshRNA慢病毒表达载体,为探讨RNA干扰技术抑制T细胞mTOR基因的相关研究奠定基础.方法:设计合成针对小鼠mTOR基因的shRNA片段,与酶切后的pLKD.UBC.GFP.U6载体片段进行连接并转化DH5α,提取阳性克隆质粒,测序,转染293T细胞.通过GFP表达水平测定病毒滴度.结果:DNA测序结果及PCR鉴定证实成功构建小鼠mTOR-shRNA重组慢病毒载体,对其进行包装后测定慢病毒滴度为1.38E+ 08 TU/ml.结论:成功构建并包装小鼠mTOR-shRNA重组慢病毒表达载体.
目的:構建mTORshRNA慢病毒錶達載體,為探討RNA榦擾技術抑製T細胞mTOR基因的相關研究奠定基礎.方法:設計閤成針對小鼠mTOR基因的shRNA片段,與酶切後的pLKD.UBC.GFP.U6載體片段進行連接併轉化DH5α,提取暘性剋隆質粒,測序,轉染293T細胞.通過GFP錶達水平測定病毒滴度.結果:DNA測序結果及PCR鑒定證實成功構建小鼠mTOR-shRNA重組慢病毒載體,對其進行包裝後測定慢病毒滴度為1.38E+ 08 TU/ml.結論:成功構建併包裝小鼠mTOR-shRNA重組慢病毒錶達載體.
목적:구건mTORshRNA만병독표체재체,위탐토RNA간우기술억제T세포mTOR기인적상관연구전정기출.방법:설계합성침대소서mTOR기인적shRNA편단,여매절후적pLKD.UBC.GFP.U6재체편단진행련접병전화DH5α,제취양성극륭질립,측서,전염293T세포.통과GFP표체수평측정병독적도.결과:DNA측서결과급PCR감정증실성공구건소서mTOR-shRNA중조만병독재체,대기진행포장후측정만병독적도위1.38E+ 08 TU/ml.결론:성공구건병포장소서mTOR-shRNA중조만병독표체재체.
