中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2012年
11期
907-910
,共4页
王茜%常继涛%刘云%于力
王茜%常繼濤%劉雲%于力
왕천%상계도%류운%우력
牛嵴病毒%VP3蛋白%抗血清%间接ELISA
牛嵴病毒%VP3蛋白%抗血清%間接ELISA
우척병독%VP3단백%항혈청%간접ELISA
牛嵴病-毒(BKV)是近几年在牛消化道中新发现的病毒,其致病性尚不清楚.我们的相关研究已表明,该病毒在我国的牛群中普遍存在.为重组表达BKV VP3蛋白,本研究采用RT-PCR方法从牛腹泻粪便样品中扩增BKV VP3蛋白的编码基因,将其克隆至pET-28a(+)载体中构建原核重组表达质粒pET-VP3.将pET-VP3转化至大肠杆菌BL21(DE3)中.经IPTG诱导表达及SDS -PAGE分析表明重组蛋白分子量约为27.8 ku,以包涵体形式存在.采用电洗脱方法纯化该重组蛋白并免疫BALB/c小鼠,制备抗BKV VP3的多克隆抗体.以纯化的重组蛋白作为包被抗原,初步建立了间接ELISA抗体检测方法.小范围调查结果显示,在检测的牛群中BKV感染率较高.
牛嵴病-毒(BKV)是近幾年在牛消化道中新髮現的病毒,其緻病性尚不清楚.我們的相關研究已錶明,該病毒在我國的牛群中普遍存在.為重組錶達BKV VP3蛋白,本研究採用RT-PCR方法從牛腹瀉糞便樣品中擴增BKV VP3蛋白的編碼基因,將其剋隆至pET-28a(+)載體中構建原覈重組錶達質粒pET-VP3.將pET-VP3轉化至大腸桿菌BL21(DE3)中.經IPTG誘導錶達及SDS -PAGE分析錶明重組蛋白分子量約為27.8 ku,以包涵體形式存在.採用電洗脫方法純化該重組蛋白併免疫BALB/c小鼠,製備抗BKV VP3的多剋隆抗體.以純化的重組蛋白作為包被抗原,初步建立瞭間接ELISA抗體檢測方法.小範圍調查結果顯示,在檢測的牛群中BKV感染率較高.
우척병-독(BKV)시근궤년재우소화도중신발현적병독,기치병성상불청초.아문적상관연구이표명,해병독재아국적우군중보편존재.위중조표체BKV VP3단백,본연구채용RT-PCR방법종우복사분편양품중확증BKV VP3단백적편마기인,장기극륭지pET-28a(+)재체중구건원핵중조표체질립pET-VP3.장pET-VP3전화지대장간균BL21(DE3)중.경IPTG유도표체급SDS -PAGE분석표명중조단백분자량약위27.8 ku,이포함체형식존재.채용전세탈방법순화해중조단백병면역BALB/c소서,제비항BKV VP3적다극륭항체.이순화적중조단백작위포피항원,초보건립료간접ELISA항체검측방법.소범위조사결과현시,재검측적우군중BKV감염솔교고.
