中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2012年
11期
898-902
,共5页
张文利%孙丰廷%王海光%刘灿%英聪%宁宜宝
張文利%孫豐廷%王海光%劉燦%英聰%寧宜寶
장문리%손봉정%왕해광%류찬%영총%저의보
高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗GDr180%双重荧光RT-PCR%MGB探针%鉴别检测
高緻病性豬繁殖與呼吸綜閤徵活疫苗GDr180%雙重熒光RT-PCR%MGB探針%鑒彆檢測
고치병성저번식여호흡종합정활역묘GDr180%쌍중형광RT-PCR%MGB탐침%감별검측
为建立一种能够快速鉴别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GDr180疫苗株与GD野毒株的双重荧光定量RT-PCR方法,本研究在PPRSV的Nsp2基因和Orf7基因区域分别设计不同荧光标记的MGB探针及特异性引物.这两种MGB探针能够分别特异结合GD野毒株和GDr180疫苗株.通过对PRRSV培养液、感染猪血清和组织样品检测证明了该方法的可行性;采用双重实时荧光定量RT-PCR方法检测PRRSV GDr180疫苗株和GD强毒株时敏感性分别达到19.4拷贝/μL和34.2拷贝/μL;该方法与PRRSV其他8个病毒株和猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型和猪细小病毒不发生交叉反应,表明该方法具有良好的特异性;因此可以用于PRRSV GDr180疫苗株与野毒株的鉴别检测.
為建立一種能夠快速鑒彆檢測豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV) GDr180疫苗株與GD野毒株的雙重熒光定量RT-PCR方法,本研究在PPRSV的Nsp2基因和Orf7基因區域分彆設計不同熒光標記的MGB探針及特異性引物.這兩種MGB探針能夠分彆特異結閤GD野毒株和GDr180疫苗株.通過對PRRSV培養液、感染豬血清和組織樣品檢測證明瞭該方法的可行性;採用雙重實時熒光定量RT-PCR方法檢測PRRSV GDr180疫苗株和GD彊毒株時敏感性分彆達到19.4拷貝/μL和34.2拷貝/μL;該方法與PRRSV其他8箇病毒株和豬瘟病毒、豬偽狂犬病毒、豬圓環病毒2型和豬細小病毒不髮生交扠反應,錶明該方法具有良好的特異性;因此可以用于PRRSV GDr180疫苗株與野毒株的鑒彆檢測.
위건립일충능구쾌속감별검측저번식여호흡종합정병독(PRRSV) GDr180역묘주여GD야독주적쌍중형광정량RT-PCR방법,본연구재PPRSV적Nsp2기인화Orf7기인구역분별설계불동형광표기적MGB탐침급특이성인물.저량충MGB탐침능구분별특이결합GD야독주화GDr180역묘주.통과대PRRSV배양액、감염저혈청화조직양품검측증명료해방법적가행성;채용쌍중실시형광정량RT-PCR방법검측PRRSV GDr180역묘주화GD강독주시민감성분별체도19.4고패/μL화34.2고패/μL;해방법여PRRSV기타8개병독주화저온병독、저위광견병독、저원배병독2형화저세소병독불발생교차반응,표명해방법구유량호적특이성;인차가이용우PRRSV GDr180역묘주여야독주적감별검측.