中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2012年
12期
937-941
,共5页
刘彦云%刘春国%石薇琳%王伟%吕让%刘明
劉彥雲%劉春國%石薇琳%王偉%呂讓%劉明
류언운%류춘국%석미림%왕위%려양%류명
禽流感%H9N2亚型%反向遗传%细胞苗
禽流感%H9N2亞型%反嚮遺傳%細胞苗
금류감%H9N2아형%반향유전%세포묘
为构建能够在MDCK细胞中高水平复制的H9N2亚型禽流感病毒(AIV)疫苗株,本研究在对病毒生长特性及HA基因遗传进化分析的基础上,筛选出一株细胞高度适应的国内流行株A/chicken/Shanghai/11/2011(H9N2) (SH11),并通过反向遗传操作技术拯救出全部基因均来自亲本株的AIV rSH11株.生物学试验结果表明rSH11在鸡胚半数感染量(EID50)、组织培养半数感染量(TCID50)、遗传稳定性等方面均与亲本株保持一致,rSH11经MDCK细胞连续传5代后血凝价稳定在1∶1024,表明该病毒株具有细胞高度增殖的特性.采用rSH11株制备油乳剂灭活苗免疫4周龄SPF鸡,免疫一周即可以检测出HI抗体,免疫3周后HI抗体平均效价高于1∶700,表明其具有良好的免疫原性.rSH11疫苗对不同的H9N2病毒株能够产生良好的免疫保护作用,显著抑制免疫鸡排毒.H9N2亚型AIV细胞高产株的拯救为该亚型AIV细胞苗的研制奠定了基础.
為構建能夠在MDCK細胞中高水平複製的H9N2亞型禽流感病毒(AIV)疫苗株,本研究在對病毒生長特性及HA基因遺傳進化分析的基礎上,篩選齣一株細胞高度適應的國內流行株A/chicken/Shanghai/11/2011(H9N2) (SH11),併通過反嚮遺傳操作技術拯救齣全部基因均來自親本株的AIV rSH11株.生物學試驗結果錶明rSH11在鷄胚半數感染量(EID50)、組織培養半數感染量(TCID50)、遺傳穩定性等方麵均與親本株保持一緻,rSH11經MDCK細胞連續傳5代後血凝價穩定在1∶1024,錶明該病毒株具有細胞高度增殖的特性.採用rSH11株製備油乳劑滅活苗免疫4週齡SPF鷄,免疫一週即可以檢測齣HI抗體,免疫3週後HI抗體平均效價高于1∶700,錶明其具有良好的免疫原性.rSH11疫苗對不同的H9N2病毒株能夠產生良好的免疫保護作用,顯著抑製免疫鷄排毒.H9N2亞型AIV細胞高產株的拯救為該亞型AIV細胞苗的研製奠定瞭基礎.
위구건능구재MDCK세포중고수평복제적H9N2아형금류감병독(AIV)역묘주,본연구재대병독생장특성급HA기인유전진화분석적기출상,사선출일주세포고도괄응적국내류행주A/chicken/Shanghai/11/2011(H9N2) (SH11),병통과반향유전조작기술증구출전부기인균래자친본주적AIV rSH11주.생물학시험결과표명rSH11재계배반수감염량(EID50)、조직배양반수감염량(TCID50)、유전은정성등방면균여친본주보지일치,rSH11경MDCK세포련속전5대후혈응개은정재1∶1024,표명해병독주구유세포고도증식적특성.채용rSH11주제비유유제멸활묘면역4주령SPF계,면역일주즉가이검측출HI항체,면역3주후HI항체평균효개고우1∶700,표명기구유량호적면역원성.rSH11역묘대불동적H9N2병독주능구산생량호적면역보호작용,현저억제면역계배독.H9N2아형AIV세포고산주적증구위해아형AIV세포묘적연제전정료기출.
