中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
1期
54-57
,共4页
么乃全%高云航%于丹%张敏%耿磊%王全凯
麽迺全%高雲航%于丹%張敏%耿磊%王全凱
요내전%고운항%우단%장민%경뢰%왕전개
鸭疫里氏杆菌%camp基因%克隆与表达%ELISA
鴨疫裏氏桿菌%camp基因%剋隆與錶達%ELISA
압역리씨간균%camp기인%극륭여표체%ELISA
为建立鸭疫里氏杆菌(RA)的血清学快速检测方法,本研究根据GenBank中登录的camp基因序列设计引物,以吉林RA分离株JL-1的基因组DNA为模板,通过PCR扩增camp基因,并构建pET-camp重组表达质粒,转化至E.coli BL21 (DE3)中诱导表达出分子量约为37 ku重组蛋白,westemblot分析结果表明该蛋白能够与血清1、2、10、11和17型RA全菌体阳性血清发生特异性反应.以纯化的重组蛋白为包被抗原建立间接ELISA方法,结果显示其具有良好的特异性和重复性,与RA超声裂解抗原ELISA方法的符合率达到77.5％.研究结果进一步验证了Camp蛋白具有良好免疫原性,并且为RA多种血清型共同抗原,在RA的检测及亚单位疫苗开发中具有良好的应用价值.
為建立鴨疫裏氏桿菌(RA)的血清學快速檢測方法,本研究根據GenBank中登錄的camp基因序列設計引物,以吉林RA分離株JL-1的基因組DNA為模闆,通過PCR擴增camp基因,併構建pET-camp重組錶達質粒,轉化至E.coli BL21 (DE3)中誘導錶達齣分子量約為37 ku重組蛋白,westemblot分析結果錶明該蛋白能夠與血清1、2、10、11和17型RA全菌體暘性血清髮生特異性反應.以純化的重組蛋白為包被抗原建立間接ELISA方法,結果顯示其具有良好的特異性和重複性,與RA超聲裂解抗原ELISA方法的符閤率達到77.5％.研究結果進一步驗證瞭Camp蛋白具有良好免疫原性,併且為RA多種血清型共同抗原,在RA的檢測及亞單位疫苗開髮中具有良好的應用價值.
위건립압역리씨간균(RA)적혈청학쾌속검측방법,본연구근거GenBank중등록적camp기인서렬설계인물,이길림RA분리주JL-1적기인조DNA위모판,통과PCR확증camp기인,병구건pET-camp중조표체질립,전화지E.coli BL21 (DE3)중유도표체출분자량약위37 ku중조단백,westemblot분석결과표명해단백능구여혈청1、2、10、11화17형RA전균체양성혈청발생특이성반응.이순화적중조단백위포피항원건립간접ELISA방법,결과현시기구유량호적특이성화중복성,여RA초성렬해항원ELISA방법적부합솔체도77.5％.연구결과진일보험증료Camp단백구유량호면역원성,병차위RA다충혈청형공동항원,재RA적검측급아단위역묘개발중구유량호적응용개치.
