CAJ | 학술논문

为建立犬瘟热病毒(CDV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法,本研究根据GenBank中CDV N基因保守序列设计合成了2对LAMP引物,内引物FIP、BIP和外引物F3、B3.以CDV N基因重组质粒(pMD-CDV-N)为模板,经反应条件优化、特异性试验、敏感性试验及临床样品检测.检测结果显示,该方法于61℃水浴60min即可完成反应,最低检出量为70个拷贝,比RT-PCR灵敏10倍.该检测方法仅对CDV产生阳性扩增,而对狂犬病毒,犬细小病毒,犬腺病毒Ⅱ型扩增结果均为阴性.用建立的LAMP方法检测临床样品,检测结果与RT-PCR检测结果一致.本方法简便,特异,有利于CDV的临床检测.
위건립견온열병독(CDV)배개도등온확증(LAMP)검측방법,본연구근거GenBank중CDV N기인보수서렬설계합성료2대LAMP인물,내인물FIP、BIP화외인물F3、B3.이CDV N기인중조질립(pMD-CDV-N)위모판,경반응조건우화、특이성시험、민감성시험급림상양품검측.검측결과현시,해방법우61℃수욕60min즉가완성반응,최저검출량위70개고패,비RT-PCR령민10배.해검측방법부대CDV산생양성확증,이대광견병독,견세소병독,견선병독Ⅱ형확증결과균위음성.용건립적LAMP방법검측림상양품,검측결과여RT-PCR검측결과일치.본방법간편,특이,유리우CDV적림상검측.