中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
1期
5-9
,共5页
蔡扩军%马铈委%乔军%孟庆玲%陈创夫%黄炯%张再超%杨海波
蔡擴軍%馬鈰委%喬軍%孟慶玲%陳創伕%黃炯%張再超%楊海波
채확군%마시위%교군%맹경령%진창부%황형%장재초%양해파
shRNA%转基因克隆猪%体细胞%抗病毒活性
shRNA%轉基因剋隆豬%體細胞%抗病毒活性
shRNA%전기인극륭저%체세포%항병독활성
为研究靶向O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因shRNA转基因猪体细胞的抗病毒活性,本实验在成功培育转基因克隆猪的基础上,通过分离与培养转基因猪体细胞,对其shRNA进行PCR和Southern blot检测,并将FMDV感染体细胞中,通过细胞病变(CPE)、间接免疫荧光试验(IFA)和实时荧光定量PCR (Real-time PCR)分析转基因猪体细胞抗FMDV活性.结果表明,转基因猪体细胞基因组DNA中携带有靶向FMDV VP1基因的shRNA基因片段.与非转基因猪体细胞相比,接种FMDV转基因猪体细胞其出现CPE的时间延迟,细胞内病毒含量显著降低,细胞感染病毒36h时,对细胞中FMDV VP1基因抑制效率为53.6％.表明该靶向FMDV shRNA转基因克隆猪体细胞在体外具有良好的抗病毒活性.本研究为进一步在体内评价转基因动物的抗病毒活性奠定了基础.
為研究靶嚮O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因shRNA轉基因豬體細胞的抗病毒活性,本實驗在成功培育轉基因剋隆豬的基礎上,通過分離與培養轉基因豬體細胞,對其shRNA進行PCR和Southern blot檢測,併將FMDV感染體細胞中,通過細胞病變(CPE)、間接免疫熒光試驗(IFA)和實時熒光定量PCR (Real-time PCR)分析轉基因豬體細胞抗FMDV活性.結果錶明,轉基因豬體細胞基因組DNA中攜帶有靶嚮FMDV VP1基因的shRNA基因片段.與非轉基因豬體細胞相比,接種FMDV轉基因豬體細胞其齣現CPE的時間延遲,細胞內病毒含量顯著降低,細胞感染病毒36h時,對細胞中FMDV VP1基因抑製效率為53.6％.錶明該靶嚮FMDV shRNA轉基因剋隆豬體細胞在體外具有良好的抗病毒活性.本研究為進一步在體內評價轉基因動物的抗病毒活性奠定瞭基礎.
위연구파향O형구제역병독(FMDV)VP1기인shRNA전기인저체세포적항병독활성,본실험재성공배육전기인극륭저적기출상,통과분리여배양전기인저체세포,대기shRNA진행PCR화Southern blot검측,병장FMDV감염체세포중,통과세포병변(CPE)、간접면역형광시험(IFA)화실시형광정량PCR (Real-time PCR)분석전기인저체세포항FMDV활성.결과표명,전기인저체세포기인조DNA중휴대유파향FMDV VP1기인적shRNA기인편단.여비전기인저체세포상비,접충FMDV전기인저체세포기출현CPE적시간연지,세포내병독함량현저강저,세포감염병독36h시,대세포중FMDV VP1기인억제효솔위53.6％.표명해파향FMDV shRNA전기인극륭저체세포재체외구유량호적항병독활성.본연구위진일보재체내평개전기인동물적항병독활성전정료기출.
