CAJ | 학술논문

为建立通用型禽流感病毒(AIV)快速检测方法,本研究将合成的同义NP (ConsNP)基因克隆于pET30a中,利用大肠杆菌系统进行原核表达,以纯化重组ConsNP蛋白作为包被抗原,建立了检测AIVNP抗体的间接ConsNP-ELISA方法,并优化了反应条件.结果表明:抗原包被量为1μg/孔；封闭剂为5％脱脂乳；一抗血清稀释度为1∶200; HRP标记的兔抗鸡IgG(酶标二抗)稀释度为1∶20 000；阴阳性临界值为:OD49nm值＞0.239.该间接ELISA方法与其他亚型AIV阳性血清均呈阳性反应,与新城疫病毒,马力克病病毒,禽传染性囊病病毒阳性血清无交叉反应,具有良好的特异性和敏感性.本研究为进一步研制通用型的禽流感ConsNP-ELISA检测试剂盒奠定了基础.
위건립통용형금류감병독(AIV)쾌속검측방법,본연구장합성적동의NP (ConsNP)기인극륭우pET30a중,이용대장간균계통진행원핵표체,이순화중조ConsNP단백작위포피항원,건립료검측AIVNP항체적간접ConsNP-ELISA방법,병우화료반응조건.결과표명:항원포피량위1μg/공；봉폐제위5％탈지유；일항혈청희석도위1∶200; HRP표기적토항계IgG(매표이항)희석도위1∶20 000；음양성림계치위:OD49nm치＞0.239.해간접ELISA방법여기타아형AIV양성혈청균정양성반응,여신성역병독,마력극병병독,금전염성낭병병독양성혈청무교차반응,구유량호적특이성화민감성.본연구위진일보연제통용형적금류감ConsNP-ELISA검측시제합전정료기출.