中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
6期
453-455
,共3页
成钢%王京仁%曾文虎%李淑红%王文彬
成鋼%王京仁%曾文虎%李淑紅%王文彬
성강%왕경인%증문호%리숙홍%왕문빈
东方田鼠%皮肤成纤维细胞%永生化%SV40T抗原
東方田鼠%皮膚成纖維細胞%永生化%SV40T抗原
동방전서%피부성섬유세포%영생화%SV40T항원
Microtus forti%skin fibroblas%immortalization%SV40 T antigen
为建立东方田鼠皮肤成纤维细胞(MfSF)系,本研究采用脂质体基因转染法将含有SV40T基因的pSV3neo重组质粒导入原代MfSF中,通过G418筛选,阳性克隆扩大培养,建立永生化MfSF系.实验结果表明,阳性细胞克隆在G418筛选第三周后出现,经扩大培养已稳定传代达42代,而且生长状态良好,PCR及RT-PCR检测结果表明,SV40 T基因已整合到MfSF中并稳定表达.本研究利用SV40 T基因导入制备了永生化MfSF细胞系,为动物间成纤维细胞比较研究及相关病原的研究提供了敏感细胞系.
為建立東方田鼠皮膚成纖維細胞(MfSF)繫,本研究採用脂質體基因轉染法將含有SV40T基因的pSV3neo重組質粒導入原代MfSF中,通過G418篩選,暘性剋隆擴大培養,建立永生化MfSF繫.實驗結果錶明,暘性細胞剋隆在G418篩選第三週後齣現,經擴大培養已穩定傳代達42代,而且生長狀態良好,PCR及RT-PCR檢測結果錶明,SV40 T基因已整閤到MfSF中併穩定錶達.本研究利用SV40 T基因導入製備瞭永生化MfSF細胞繫,為動物間成纖維細胞比較研究及相關病原的研究提供瞭敏感細胞繫.
위건립동방전서피부성섬유세포(MfSF)계,본연구채용지질체기인전염법장함유SV40T기인적pSV3neo중조질립도입원대MfSF중,통과G418사선,양성극륭확대배양,건립영생화MfSF계.실험결과표명,양성세포극륭재G418사선제삼주후출현,경확대배양이은정전대체42대,이차생장상태량호,PCR급RT-PCR검측결과표명,SV40 T기인이정합도MfSF중병은정표체.본연구이용SV40 T기인도입제비료영생화MfSF세포계,위동물간성섬유세포비교연구급상관병원적연구제공료민감세포계.
