中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
6期
436-439
,共4页
王伟%刘春国%王寿山%张超林%刘彦云%吕让%刘明
王偉%劉春國%王壽山%張超林%劉彥雲%呂讓%劉明
왕위%류춘국%왕수산%장초림%류언운%려양%류명
禽流感病毒%H5N1亚型%HA基因%重组腺病毒
禽流感病毒%H5N1亞型%HA基因%重組腺病毒
금류감병독%H5N1아형%HA기인%중조선병독
avian influenza virus%H5N1 subtype%HA gene%recombinant adenovirus
为构建表达H5N1亚型clade 2.3.4禽流感病毒(AIV) HA基因的重组腺病毒,本研究通过RT-PCR扩增A/wild duck/Shandong/628/201 1(H5NI)的HA基因,克隆于腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,构建重组腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV-HA.采用Ad-Easy技术,制备表达AIVHA基因的复制缺陷型重组腺病毒rAd-HA.将rAd-HA感染Ad293细胞,可产生明显的细胞病变.通过细胞超薄切片观察到完整的腺病毒颗粒.经RT-PCR、间接免疫荧光及western blot证明HA基因在Ad293细胞中成功转录和表达,并且表达的蛋白具有良好的生物学活性.本研究为新型H5N1亚型AIV活载体疫苗的研发奠定了基础.
為構建錶達H5N1亞型clade 2.3.4禽流感病毒(AIV) HA基因的重組腺病毒,本研究通過RT-PCR擴增A/wild duck/Shandong/628/201 1(H5NI)的HA基因,剋隆于腺病毒穿梭質粒pShuttle-CMV中,構建重組腺病毒穿梭質粒pShuttle-CMV-HA.採用Ad-Easy技術,製備錶達AIVHA基因的複製缺陷型重組腺病毒rAd-HA.將rAd-HA感染Ad293細胞,可產生明顯的細胞病變.通過細胞超薄切片觀察到完整的腺病毒顆粒.經RT-PCR、間接免疫熒光及western blot證明HA基因在Ad293細胞中成功轉錄和錶達,併且錶達的蛋白具有良好的生物學活性.本研究為新型H5N1亞型AIV活載體疫苗的研髮奠定瞭基礎.
위구건표체H5N1아형clade 2.3.4금류감병독(AIV) HA기인적중조선병독,본연구통과RT-PCR확증A/wild duck/Shandong/628/201 1(H5NI)적HA기인,극륭우선병독천사질립pShuttle-CMV중,구건중조선병독천사질립pShuttle-CMV-HA.채용Ad-Easy기술,제비표체AIVHA기인적복제결함형중조선병독rAd-HA.장rAd-HA감염Ad293세포,가산생명현적세포병변.통과세포초박절편관찰도완정적선병독과립.경RT-PCR、간접면역형광급western blot증명HA기인재Ad293세포중성공전록화표체,병차표체적단백구유량호적생물학활성.본연구위신형H5N1아형AIV활재체역묘적연발전정료기출.
