中国血吸虫病防治杂志
中國血吸蟲病防治雜誌
중국혈흡충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
2013年
2期
167-171,176
,共6页
白亮%朱国鼎%唐建霞%张超%刘耀宝%李菊林%曹俊%高琪
白亮%硃國鼎%唐建霞%張超%劉耀寶%李菊林%曹俊%高琪
백량%주국정%당건하%장초%류요보%리국림%조준%고기
中华按蚊%kdr基因%基因突变%TaqMan-MGB探针%实时荧光定量PCR
中華按蚊%kdr基因%基因突變%TaqMan-MGB探針%實時熒光定量PCR
중화안문%kdr기인%기인돌변%TaqMan-MGB탐침%실시형광정량PCR
目的 建立一种用于中华按蚊杀虫剂抗性相关kdr基因突变检测的实时荧光定量PCR方法.方法 根据中华按蚊kdr基因序列及其L1014位点常见的突变类型设计一对引物和三条TaqMan-MGB探针,对TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR反应体系和条件进行了优化,选择经测序鉴定后的6种中华按蚊kdr基因常见类型对该方法进行验证,并用该方法对50个实验室和113个现场中华按蚊样本进行检测.结果 实时荧光定量PCR方法能对中华按蚊kdr基因6种不同的基因型进行检测,单管法可判断kdr基因L1014是否发生突变,双管法可对具体突变类型进一步鉴别.经检测,50个实验室样本均为野生型纯合体,而113个现场样本中,仅12个样本为野生型纯合体,其余101个样本均发生了L1014F或L1014C突变,突变频率为87.61％.结论 TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR可用于中华按蚊kdr基因L1014位点突变的检测.
目的 建立一種用于中華按蚊殺蟲劑抗性相關kdr基因突變檢測的實時熒光定量PCR方法.方法 根據中華按蚊kdr基因序列及其L1014位點常見的突變類型設計一對引物和三條TaqMan-MGB探針,對TaqMan-MGB探針實時熒光定量PCR反應體繫和條件進行瞭優化,選擇經測序鑒定後的6種中華按蚊kdr基因常見類型對該方法進行驗證,併用該方法對50箇實驗室和113箇現場中華按蚊樣本進行檢測.結果 實時熒光定量PCR方法能對中華按蚊kdr基因6種不同的基因型進行檢測,單管法可判斷kdr基因L1014是否髮生突變,雙管法可對具體突變類型進一步鑒彆.經檢測,50箇實驗室樣本均為野生型純閤體,而113箇現場樣本中,僅12箇樣本為野生型純閤體,其餘101箇樣本均髮生瞭L1014F或L1014C突變,突變頻率為87.61％.結論 TaqMan-MGB探針實時熒光定量PCR可用于中華按蚊kdr基因L1014位點突變的檢測.
목적 건립일충용우중화안문살충제항성상관kdr기인돌변검측적실시형광정량PCR방법.방법 근거중화안문kdr기인서렬급기L1014위점상견적돌변류형설계일대인물화삼조TaqMan-MGB탐침,대TaqMan-MGB탐침실시형광정량PCR반응체계화조건진행료우화,선택경측서감정후적6충중화안문kdr기인상견류형대해방법진행험증,병용해방법대50개실험실화113개현장중화안문양본진행검측.결과 실시형광정량PCR방법능대중화안문kdr기인6충불동적기인형진행검측,단관법가판단kdr기인L1014시부발생돌변,쌍관법가대구체돌변류형진일보감별.경검측,50개실험실양본균위야생형순합체,이113개현장양본중,부12개양본위야생형순합체,기여101개양본균발생료L1014F혹L1014C돌변,돌변빈솔위87.61％.결론 TaqMan-MGB탐침실시형광정량PCR가용우중화안문kdr기인L1014위점돌변적검측.
