中山大学学报(医学科学版)
中山大學學報(醫學科學版)
중산대학학보(의학과학판)
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2013年
3期
378-386
,共9页
荣琼%朱双喜%陈松龄%黄代营%李祥
榮瓊%硃雙喜%陳鬆齡%黃代營%李祥
영경%주쌍희%진송령%황대영%리상
上颌窦底黏膜%骨原细胞%成骨%动物
上頜竇底黏膜%骨原細胞%成骨%動物
상합두저점막%골원세포%성골%동물
maxillary sinus floor mucosa%osteoprogenitor cells%bone formation%animal
[目的]研究犬上颌窦底黏膜骨原细胞的成骨性能.[方法]取Beagle犬上颌窦底黏膜,显微镜下观察其组织学形态.分离培养犬上颌窦底黏膜骨原细胞.流式细胞术检测一代细胞的表面抗原CD44、CD146和CD34.一代细胞经成骨诱导培养用于研究其体外成骨性能.诱导3d、7d和12d时分别检测其碱性磷酸酶活性,对照组细胞用基础培养基培养.诱导16d时,进行BMP-2免疫组化染色,对照组细胞经基础培养基培养.Western blot检测诱导0d、7d和16d时BMP-2的表达.诱导28 d时,茜素红染色和Von Kossa染色观察钙结节形成情况.二代细胞成骨诱导培养7d,与Bio-Oss复合后,植入裸鼠背部皮下,观察体内成骨情况,对照组植入Bio-Oss颗粒.[结果]犬上颌窦底黏膜由上皮层、固有层、黏膜下层和骨膜层组成,黏膜下层富含毛细血管.流式细胞术检测显示CD44和CD146阳性,CD34阴性.在3d、7d和12d时,培养细胞碱性磷酸酶活性逐渐升高,成骨诱导培养细胞高于基础培养细胞.16d时,与基础培养基中细胞相比,经成骨诱导的细胞BMP-2表达增强.Western blot检测发现诱导0d、7d和16d时BMP-2的表达明显,且逐渐升高.诱导培养28 d时,可矿化形成明显的钙结节.细胞与Bio-Oss复合物植入裸鼠皮下可观察到成骨现象,对照组没有成骨表现.[结论]与人上颌窦底黏膜相同,犬上颌窦底黏膜含有骨原细胞,具有成骨能力.
[目的]研究犬上頜竇底黏膜骨原細胞的成骨性能.[方法]取Beagle犬上頜竇底黏膜,顯微鏡下觀察其組織學形態.分離培養犬上頜竇底黏膜骨原細胞.流式細胞術檢測一代細胞的錶麵抗原CD44、CD146和CD34.一代細胞經成骨誘導培養用于研究其體外成骨性能.誘導3d、7d和12d時分彆檢測其堿性燐痠酶活性,對照組細胞用基礎培養基培養.誘導16d時,進行BMP-2免疫組化染色,對照組細胞經基礎培養基培養.Western blot檢測誘導0d、7d和16d時BMP-2的錶達.誘導28 d時,茜素紅染色和Von Kossa染色觀察鈣結節形成情況.二代細胞成骨誘導培養7d,與Bio-Oss複閤後,植入裸鼠揹部皮下,觀察體內成骨情況,對照組植入Bio-Oss顆粒.[結果]犬上頜竇底黏膜由上皮層、固有層、黏膜下層和骨膜層組成,黏膜下層富含毛細血管.流式細胞術檢測顯示CD44和CD146暘性,CD34陰性.在3d、7d和12d時,培養細胞堿性燐痠酶活性逐漸升高,成骨誘導培養細胞高于基礎培養細胞.16d時,與基礎培養基中細胞相比,經成骨誘導的細胞BMP-2錶達增彊.Western blot檢測髮現誘導0d、7d和16d時BMP-2的錶達明顯,且逐漸升高.誘導培養28 d時,可礦化形成明顯的鈣結節.細胞與Bio-Oss複閤物植入裸鼠皮下可觀察到成骨現象,對照組沒有成骨錶現.[結論]與人上頜竇底黏膜相同,犬上頜竇底黏膜含有骨原細胞,具有成骨能力.
[목적]연구견상합두저점막골원세포적성골성능.[방법]취Beagle견상합두저점막,현미경하관찰기조직학형태.분리배양견상합두저점막골원세포.류식세포술검측일대세포적표면항원CD44、CD146화CD34.일대세포경성골유도배양용우연구기체외성골성능.유도3d、7d화12d시분별검측기감성린산매활성,대조조세포용기출배양기배양.유도16d시,진행BMP-2면역조화염색,대조조세포경기출배양기배양.Western blot검측유도0d、7d화16d시BMP-2적표체.유도28 d시,천소홍염색화Von Kossa염색관찰개결절형성정황.이대세포성골유도배양7d,여Bio-Oss복합후,식입라서배부피하,관찰체내성골정황,대조조식입Bio-Oss과립.[결과]견상합두저점막유상피층、고유층、점막하층화골막층조성,점막하층부함모세혈관.류식세포술검측현시CD44화CD146양성,CD34음성.재3d、7d화12d시,배양세포감성린산매활성축점승고,성골유도배양세포고우기출배양세포.16d시,여기출배양기중세포상비,경성골유도적세포BMP-2표체증강.Western blot검측발현유도0d、7d화16d시BMP-2적표체명현,차축점승고.유도배양28 d시,가광화형성명현적개결절.세포여Bio-Oss복합물식입라서피하가관찰도성골현상,대조조몰유성골표현.[결론]여인상합두저점막상동,견상합두저점막함유골원세포,구유성골능력.