江苏大学学报（医学版）
江囌大學學報（醫學版）
강소대학학보（의학판）
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2013年
3期
207-211
,共5页
鞠爱萍%吴亮%沈进%李礼%姜旭淦%陈盛霞
鞠愛萍%吳亮%瀋進%李禮%薑旭淦%陳盛霞
국애평%오량%침진%리례%강욱감%진성하
弓形虫%棒状体蛋白18%原核表达%KCl染色
弓形蟲%棒狀體蛋白18%原覈錶達%KCl染色
궁형충%봉상체단백18%원핵표체%KCl염색
Toxoplasma gondii%rhoptry protein 18%prokaryotic expression%KCl stain
目的:原核表达刚地弓形虫RH株棒状体蛋白(rhoptry proteins,ROPs) 18,建立检测和定位虫体ROP18蛋白的方法.方法:运用PCR技术扩增弓形虫RH株速殖子ROP18基因,克隆至pET-28a(+)载体,转化至大肠埃希菌Rosetta中诱导表达,经KC1染色切胶纯化重组ROP18蛋白,并制备其兔多克隆抗体.采用蛋白质印迹技术和间接免疫荧光技术(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测和定位ROP18在弓形虫速殖子体内的表达.结果:成功表达重组ROP18蛋白,并获得其多克隆抗体.经蛋白质印迹技术检测出虫体ROP18特异性条带,IFA技术检测出ROP18分布于虫体棒状体.结论:通过制备多克隆抗体,利用蛋白质印迹技术和IFA技术能检测和定位ROP18蛋白在弓形虫体内表达.
目的:原覈錶達剛地弓形蟲RH株棒狀體蛋白(rhoptry proteins,ROPs) 18,建立檢測和定位蟲體ROP18蛋白的方法.方法:運用PCR技術擴增弓形蟲RH株速殖子ROP18基因,剋隆至pET-28a(+)載體,轉化至大腸埃希菌Rosetta中誘導錶達,經KC1染色切膠純化重組ROP18蛋白,併製備其兔多剋隆抗體.採用蛋白質印跡技術和間接免疫熒光技術(indirect immunofluorescence assay,IFA)檢測和定位ROP18在弓形蟲速殖子體內的錶達.結果:成功錶達重組ROP18蛋白,併穫得其多剋隆抗體.經蛋白質印跡技術檢測齣蟲體ROP18特異性條帶,IFA技術檢測齣ROP18分佈于蟲體棒狀體.結論:通過製備多剋隆抗體,利用蛋白質印跡技術和IFA技術能檢測和定位ROP18蛋白在弓形蟲體內錶達.
목적:원핵표체강지궁형충RH주봉상체단백(rhoptry proteins,ROPs) 18,건립검측화정위충체ROP18단백적방법.방법:운용PCR기술확증궁형충RH주속식자ROP18기인,극륭지pET-28a(+)재체,전화지대장애희균Rosetta중유도표체,경KC1염색절효순화중조ROP18단백,병제비기토다극륭항체.채용단백질인적기술화간접면역형광기술(indirect immunofluorescence assay,IFA)검측화정위ROP18재궁형충속식자체내적표체.결과:성공표체중조ROP18단백,병획득기다극륭항체.경단백질인적기술검측출충체ROP18특이성조대,IFA기술검측출ROP18분포우충체봉상체.결론:통과제비다극륭항체,이용단백질인적기술화IFA기술능검측화정위ROP18단백재궁형충체내표체.
