CAJ | 학술논문

目的:建立体外分离培养获得人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hADSCs)的方法,并观察其形态、免疫表型、生物学特性.初步探讨其体外成骨过程中出现成脂现象的原因及机制.方法:剖宫产手术获得腹部皮下脂肪,0.15％Ⅰ型胶原酶消化法获得人脂肪间充质干细胞并进行体外培养.行MTT细胞增殖实验绘制增殖曲线,使用流式细胞及细胞免疫荧光技术检测细胞表面抗原,行成骨成脂分化鉴定其分化潜能.通过RT-PCR技术检测成骨成脂过程中过氧化物酶体增殖物激活受体γ-2 (peroxisome proliferator activated receptorγ-2,PPARγ-2)和骨桥蛋白mRNA表达情况.结果:通过分离培养,获得了大量旋涡状生长的人脂肪间充质干细胞.MTT法显示细胞增殖能力强.流式细胞鉴定结果显示,CD29、CD73、CD105、CD166高表达,CD31、CD34、CD45、HLA-DR低表达.细胞免疫荧光结果与之相符.hADSCs在特定诱导条件下,具有成骨成脂分化潜能.在成骨分化过程中同时伴有成脂发生.RT-PCR结果显示,与对照组相比,成脂诱导组PPARγ-2 mRNA有时间依赖性递增表达,差异具有统计学意义(P＜0.01).与对照组相比,成骨诱导组骨桥蛋白,PPARγ-2 mRNA均有时间依赖性递增表达,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:建立了一种分离培养hADSCs简单可靠的方法.获得的细胞具有贴壁生长、增殖活性强、干细胞表型以及多向分化等特征.hADSCs体外成骨过程中,三酰甘油的形成对成骨具有一定的促进作用.
목적:건입체외분리배양획득인지방간충질간세포(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hADSCs)적방법,병관찰기형태、면역표형、생물학특성.초보탐토기체외성골과정중출현성지현상적원인급궤제.방법:부궁산수술획득복부피하지방,0.15％Ⅰ형효원매소화법획득인지방간충질간세포병진행체외배양.행MTT세포증식실험회제증식곡선,사용류식세포급세포면역형광기술검측세포표면항원,행성골성지분화감정기분화잠능.통과RT-PCR기술검측성골성지과정중과양화물매체증식물격활수체γ-2 (peroxisome proliferator activated receptorγ-2,PPARγ-2)화골교단백mRNA표체정황.결과:통과분리배양,획득료대량선와상생장적인지방간충질간세포.MTT법현시세포증식능력강.류식세포감정결과현시,CD29、CD73、CD105、CD166고표체,CD31、CD34、CD45、HLA-DR저표체.세포면역형광결과여지상부.hADSCs재특정유도조건하,구유성골성지분화잠능.재성골분화과정중동시반유성지발생.RT-PCR결과현시,여대조조상비,성지유도조PPARγ-2 mRNA유시간의뢰성체증표체,차이구유통계학의의(P＜0.01).여대조조상비,성골유도조골교단백,PPARγ-2 mRNA균유시간의뢰성체증표체,차이구유통계학의의(P＜0.01).결론:건립료일충분리배양hADSCs간단가고적방법.획득적세포구유첩벽생장、증식활성강、간세포표형이급다향분화등특정.hADSCs체외성골과정중,삼선감유적형성대성골구유일정적촉진작용.