广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
9期
140-142,145
,共4页
曹山%饶国栋%魏弘宜%蒋湘宁%陆海
曹山%饒國棟%魏弘宜%蔣湘寧%陸海
조산%요국동%위홍의%장상저%륙해
毛白杨%4CL-like基因%克隆%原核表达
毛白楊%4CL-like基因%剋隆%原覈錶達
모백양%4CL-like기인%극륭%원핵표체
为得到毛白杨4CL-like基因并对其原核表达特性进行分析,利用毛白杨叶片的总RNA反转录得到的总cDNA为模板,利用PCR技术克隆得到毛白杨4CL-like基因(登录号:XP_002315339.1).利用MEGA软件对4CL-like基因及其他9个来自不同物种的4CL基因进行进化树分析.最后通过构建pET30-4CL-like原核表达载体对该基因进行原核表达分析.结果显示,克隆得到的4CL-like基因CDS区全长为1 758 bp,编码585个氨基酸.系统进化分析表明,该基因与葡萄中的4CL-like5有很高的同源性.另外,SDS-PAGE分析表明,4CL-like基因在大肠杆菌BL21中成功表达,所表达融合蛋白的分子量约为60 ku.
為得到毛白楊4CL-like基因併對其原覈錶達特性進行分析,利用毛白楊葉片的總RNA反轉錄得到的總cDNA為模闆,利用PCR技術剋隆得到毛白楊4CL-like基因(登錄號:XP_002315339.1).利用MEGA軟件對4CL-like基因及其他9箇來自不同物種的4CL基因進行進化樹分析.最後通過構建pET30-4CL-like原覈錶達載體對該基因進行原覈錶達分析.結果顯示,剋隆得到的4CL-like基因CDS區全長為1 758 bp,編碼585箇氨基痠.繫統進化分析錶明,該基因與葡萄中的4CL-like5有很高的同源性.另外,SDS-PAGE分析錶明,4CL-like基因在大腸桿菌BL21中成功錶達,所錶達融閤蛋白的分子量約為60 ku.
위득도모백양4CL-like기인병대기원핵표체특성진행분석,이용모백양협편적총RNA반전록득도적총cDNA위모판,이용PCR기술극륭득도모백양4CL-like기인(등록호:XP_002315339.1).이용MEGA연건대4CL-like기인급기타9개래자불동물충적4CL기인진행진화수분석.최후통과구건pET30-4CL-like원핵표체재체대해기인진행원핵표체분석.결과현시,극륭득도적4CL-like기인CDS구전장위1 758 bp,편마585개안기산.계통진화분석표명,해기인여포도중적4CL-like5유흔고적동원성.령외,SDS-PAGE분석표명,4CL-like기인재대장간균BL21중성공표체,소표체융합단백적분자량약위60 ku.
