医药前沿
醫藥前沿
의약전연
YIAYAO QIANYAN
2013年
19期
48-49,50
,共3页
申德山%刘亚蕊%张清彬(通讯作者)%唐伟峰
申德山%劉亞蕊%張清彬(通訊作者)%唐偉峰
신덕산%류아예%장청빈(통신작자)%당위봉
sirtuin 1%细胞培养%牙周膜干细胞%成骨作用
sirtuin 1%細胞培養%牙週膜榦細胞%成骨作用
sirtuin 1%세포배양%아주막간세포%성골작용
sirtuin 1%cell culture%periodontal ligament stem cells%osteogenic effects
目的研究蛋白酶sirtuin 1在牙周膜干细胞骨向分化中的作用。方法筛选人因正畸而拔除的前磨牙,获取牙周膜组织做细胞培养;将细胞按照实验组、对照组进行分组。实验组I:加入Sirtuin1激活剂白藜芦醇使其工作浓度为1 mM,5mM,10mM,实验组I:加入Sirtuin1抑制剂烟酰胺使其终末工作浓度为1 mM,5mM,10mM,对照组为空白对照。获取培养后细胞做蛋白酶Sirtuin2和各种细胞骨向分化标志物检测:West-blotting检测Sirtuin1和各种骨向分化标志物蛋白的表达;RT-PCR检测骨向分化标志物ALP,骨桥蛋白,骨钙蛋白和骨涎蛋白。结果通过检测细胞的蛋白酶Sirtuin1和骨向分化标志物ALP,骨桥蛋白,骨钙蛋白和骨涎蛋白的mRNA,表明随着加入白芦藜醇的剂量的差异而出现梯度的上调;而随着烟酰胺的浓度的升高而出现梯度的下调。结论sirtuin 1可以有效的促进牙周膜干细胞骨向分化,从而促进牙槽骨再生修复重建,具有良好的临床应用前景。
目的研究蛋白酶sirtuin 1在牙週膜榦細胞骨嚮分化中的作用。方法篩選人因正畸而拔除的前磨牙,穫取牙週膜組織做細胞培養;將細胞按照實驗組、對照組進行分組。實驗組I:加入Sirtuin1激活劑白藜蘆醇使其工作濃度為1 mM,5mM,10mM,實驗組I:加入Sirtuin1抑製劑煙酰胺使其終末工作濃度為1 mM,5mM,10mM,對照組為空白對照。穫取培養後細胞做蛋白酶Sirtuin2和各種細胞骨嚮分化標誌物檢測:West-blotting檢測Sirtuin1和各種骨嚮分化標誌物蛋白的錶達;RT-PCR檢測骨嚮分化標誌物ALP,骨橋蛋白,骨鈣蛋白和骨涎蛋白。結果通過檢測細胞的蛋白酶Sirtuin1和骨嚮分化標誌物ALP,骨橋蛋白,骨鈣蛋白和骨涎蛋白的mRNA,錶明隨著加入白蘆藜醇的劑量的差異而齣現梯度的上調;而隨著煙酰胺的濃度的升高而齣現梯度的下調。結論sirtuin 1可以有效的促進牙週膜榦細胞骨嚮分化,從而促進牙槽骨再生脩複重建,具有良好的臨床應用前景。
목적연구단백매sirtuin 1재아주막간세포골향분화중적작용。방법사선인인정기이발제적전마아,획취아주막조직주세포배양;장세포안조실험조、대조조진행분조。실험조I:가입Sirtuin1격활제백려호순사기공작농도위1 mM,5mM,10mM,실험조I:가입Sirtuin1억제제연선알사기종말공작농도위1 mM,5mM,10mM,대조조위공백대조。획취배양후세포주단백매Sirtuin2화각충세포골향분화표지물검측:West-blotting검측Sirtuin1화각충골향분화표지물단백적표체;RT-PCR검측골향분화표지물ALP,골교단백,골개단백화골연단백。결과통과검측세포적단백매Sirtuin1화골향분화표지물ALP,골교단백,골개단백화골연단백적mRNA,표명수착가입백호려순적제량적차이이출현제도적상조;이수착연선알적농도적승고이출현제도적하조。결론sirtuin 1가이유효적촉진아주막간세포골향분화,종이촉진아조골재생수복중건,구유량호적림상응용전경。
Objective: To identify the role of SIRT1 in osteogenic differentiation of periodontal ligament stem cels. Method: we investigated the effects of overexpressing and underexpressing SIRT1 on the differentiation of periodontal ligament stem cels, Expression of SIRT1 and osteoblastic differentiation markers was assessed by RT-PCR, and western blotting. Result: Activation of SIRT1 using resveratrol stimulated osteoblastic differentiation in a dose-dependent manner, as assessed by the expression of mRNAs encoding alkaline phosphatase, osteopontin, osteocalcin, osterix and Runx2, and induced calcium deposition. In contrast, inhibition of SIRT1 using nicotinamide suppressed mineralization and the expression of osteoblast marker mRNAs.. Conclusion: It is verified that SIRT1 is a potent regulator of differentiation of human periodontal ligament cells and may have clinical implications for periodontal bone regeneration.