河南农业大学学报
河南農業大學學報
하남농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS HENANENSIS
2013年
3期
272-277
,共6页
卢妍妍%李海英%茹广欣%林彩丽%陈志涛%杨阳
盧妍妍%李海英%茹廣訢%林綵麗%陳誌濤%楊暘
로연연%리해영%여엄흔%림채려%진지도%양양
泡桐属植物%正交试验%单因素%ISSR体系优化
泡桐屬植物%正交試驗%單因素%ISSR體繫優化
포동속식물%정교시험%단인소%ISSR체계우화
Paulownia%orthogonal design%single factor%ISSR system establishment and optimization
为建立和优化泡桐属植物高效、稳定的ISSR-PCR反应体系,本试验采用了5因素4水平的正交试验以及单因素梯度优化相结合的方法,筛选出了泡桐属植物最适的ISSR-PCR反应体系,即20μL体系中含buffer 2.5μL,Taq酶2.0U,Mg2+ 3.75 mmol·L-1,0.4 mmol·L-1dNTPs,引物0.35 mmol·L-1,模板40 ng.扩增程序为:94℃预变性5 min,然后94℃变性30 s,55℃复性45 s,72℃延伸90 s,40个循环,72℃延伸7 min,最后4℃保温.
為建立和優化泡桐屬植物高效、穩定的ISSR-PCR反應體繫,本試驗採用瞭5因素4水平的正交試驗以及單因素梯度優化相結閤的方法,篩選齣瞭泡桐屬植物最適的ISSR-PCR反應體繫,即20μL體繫中含buffer 2.5μL,Taq酶2.0U,Mg2+ 3.75 mmol·L-1,0.4 mmol·L-1dNTPs,引物0.35 mmol·L-1,模闆40 ng.擴增程序為:94℃預變性5 min,然後94℃變性30 s,55℃複性45 s,72℃延伸90 s,40箇循環,72℃延伸7 min,最後4℃保溫.
위건립화우화포동속식물고효、은정적ISSR-PCR반응체계,본시험채용료5인소4수평적정교시험이급단인소제도우화상결합적방법,사선출료포동속식물최괄적ISSR-PCR반응체계,즉20μL체계중함buffer 2.5μL,Taq매2.0U,Mg2+ 3.75 mmol·L-1,0.4 mmol·L-1dNTPs,인물0.35 mmol·L-1,모판40 ng.확증정서위:94℃예변성5 min,연후94℃변성30 s,55℃복성45 s,72℃연신90 s,40개순배,72℃연신7 min,최후4℃보온.
