协和医学杂志
協和醫學雜誌
협화의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF PEKING UNION MEDICAL COLLEGE HOSPITAL
2013年
3期
286-293
,共8页
朱亮%刘健%雷晶%许海燕%孟洁%何泳蓝%金征宇%薛华丹
硃亮%劉健%雷晶%許海燕%孟潔%何泳藍%金徵宇%薛華丹
주량%류건%뢰정%허해연%맹길%하영람%금정우%설화단
恶性肿瘤细胞%分子影像学%磁共振靶向对比剂%趋化因子受体4
噁性腫瘤細胞%分子影像學%磁共振靶嚮對比劑%趨化因子受體4
악성종류세포%분자영상학%자공진파향대비제%추화인자수체4
目的 构建以趋化因子受体4 (C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4) 为靶点的磁共振靶向对比剂并通过体外恶性肿瘤细胞的靶向磁共振成像探讨磁共振信号变化与肿瘤细胞CXCR4 表达量的相关性.方法 用细胞免疫荧光法和流式细胞计数法分别观察和测定3 种恶性肿瘤细胞株(胰腺癌PANC-1、乳腺癌MCF-7 和肺癌A549) 的CXCR4 表达,并验证新型多肽Pep12 与3 种恶性肿瘤细胞表面的CXCR4 特异性结合的能力.化学合成超顺磁性纳米氧化铁颗粒(ultrasmallparamagnetic iron oxide nanoparticle,USPIO-Np),并与Pep12 实现共轭联接.动态光散射法测定Pep12-USPIO 的水和直径;用MTS 细胞增殖与毒性检测试剂盒测定其细胞毒性;磁共振成像检测不同浓度Pep12-USPIO 溶液的T2/T2*信号变化.普鲁士蓝染色验证Pep12-USPIO 与3 种肿瘤细胞的特异性结合,磁共振成像验证Pep12-USPIO 所致磁共振信号变化与3 种肿瘤细胞CXCR4 表达量的相关性.结果 3 种恶性肿瘤细胞株均有不同水平的CXCR4 表达,流式细胞计数的CXCR4阳性细胞百分比分别为PANC-1:18.7%;A549:2.9%;MCF-7:1.7%.多肽Pep12 与3 种恶性肿瘤细胞均能特异性结合,并且结合量与CXCR4 表达量呈正相关性(r ＝0.999,P ＝0.027).自行合成的Pep12-USPIO 在室温下长时间保持稳定的胶体状态,水和直径为(86.60 ±1.48) nm.Pep12-USPIO 细胞毒性较低,铁浓度低于25 μg/ml 时,ΔR2 值和ΔR2*值与铁浓度呈现良好的线性正比关系(△R2:R2 ＝0.996;△R2*:R2 ＝0.977).普鲁士蓝染色证实Pep12-USPIO 能够与3种恶性肿瘤细胞实现靶向结合,磁共振成像证实Pep12-USPIO 能够造成肿瘤细胞悬液磁共振T2/T2*值降低(P ＜0.01),并且ΔR2/ΔR2*值与肿瘤细胞CXCR4 表达水平呈显著的正相关(ΔR2:r ＝0.997,P ＝0.050;ΔR2*:r ＝1.000,P ＝0.019).结论 Pep12-USPIO 物理性质稳定,细胞毒性较低,能够与不同恶性肿瘤细胞株上的CXCR4 特异性结合并实现磁共振T2/T2*信号的减低,并且磁共振信号的变化与细胞株CXCR4 的表达量呈正相关.
目的 構建以趨化因子受體4 (C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4) 為靶點的磁共振靶嚮對比劑併通過體外噁性腫瘤細胞的靶嚮磁共振成像探討磁共振信號變化與腫瘤細胞CXCR4 錶達量的相關性.方法 用細胞免疫熒光法和流式細胞計數法分彆觀察和測定3 種噁性腫瘤細胞株(胰腺癌PANC-1、乳腺癌MCF-7 和肺癌A549) 的CXCR4 錶達,併驗證新型多肽Pep12 與3 種噁性腫瘤細胞錶麵的CXCR4 特異性結閤的能力.化學閤成超順磁性納米氧化鐵顆粒(ultrasmallparamagnetic iron oxide nanoparticle,USPIO-Np),併與Pep12 實現共軛聯接.動態光散射法測定Pep12-USPIO 的水和直徑;用MTS 細胞增殖與毒性檢測試劑盒測定其細胞毒性;磁共振成像檢測不同濃度Pep12-USPIO 溶液的T2/T2*信號變化.普魯士藍染色驗證Pep12-USPIO 與3 種腫瘤細胞的特異性結閤,磁共振成像驗證Pep12-USPIO 所緻磁共振信號變化與3 種腫瘤細胞CXCR4 錶達量的相關性.結果 3 種噁性腫瘤細胞株均有不同水平的CXCR4 錶達,流式細胞計數的CXCR4暘性細胞百分比分彆為PANC-1:18.7%;A549:2.9%;MCF-7:1.7%.多肽Pep12 與3 種噁性腫瘤細胞均能特異性結閤,併且結閤量與CXCR4 錶達量呈正相關性(r ＝0.999,P ＝0.027).自行閤成的Pep12-USPIO 在室溫下長時間保持穩定的膠體狀態,水和直徑為(86.60 ±1.48) nm.Pep12-USPIO 細胞毒性較低,鐵濃度低于25 μg/ml 時,ΔR2 值和ΔR2*值與鐵濃度呈現良好的線性正比關繫(△R2:R2 ＝0.996;△R2*:R2 ＝0.977).普魯士藍染色證實Pep12-USPIO 能夠與3種噁性腫瘤細胞實現靶嚮結閤,磁共振成像證實Pep12-USPIO 能夠造成腫瘤細胞懸液磁共振T2/T2*值降低(P ＜0.01),併且ΔR2/ΔR2*值與腫瘤細胞CXCR4 錶達水平呈顯著的正相關(ΔR2:r ＝0.997,P ＝0.050;ΔR2*:r ＝1.000,P ＝0.019).結論 Pep12-USPIO 物理性質穩定,細胞毒性較低,能夠與不同噁性腫瘤細胞株上的CXCR4 特異性結閤併實現磁共振T2/T2*信號的減低,併且磁共振信號的變化與細胞株CXCR4 的錶達量呈正相關.
목적 구건이추화인자수체4 (C-X-C motif chemokine receptor 4,CXCR4) 위파점적자공진파향대비제병통과체외악성종류세포적파향자공진성상탐토자공진신호변화여종류세포CXCR4 표체량적상관성.방법 용세포면역형광법화류식세포계수법분별관찰화측정3 충악성종류세포주(이선암PANC-1、유선암MCF-7 화폐암A549) 적CXCR4 표체,병험증신형다태Pep12 여3 충악성종류세포표면적CXCR4 특이성결합적능력.화학합성초순자성납미양화철과립(ultrasmallparamagnetic iron oxide nanoparticle,USPIO-Np),병여Pep12 실현공액련접.동태광산사법측정Pep12-USPIO 적수화직경;용MTS 세포증식여독성검측시제합측정기세포독성;자공진성상검측불동농도Pep12-USPIO 용액적T2/T2*신호변화.보로사람염색험증Pep12-USPIO 여3 충종류세포적특이성결합,자공진성상험증Pep12-USPIO 소치자공진신호변화여3 충종류세포CXCR4 표체량적상관성.결과 3 충악성종류세포주균유불동수평적CXCR4 표체,류식세포계수적CXCR4양성세포백분비분별위PANC-1:18.7%;A549:2.9%;MCF-7:1.7%.다태Pep12 여3 충악성종류세포균능특이성결합,병차결합량여CXCR4 표체량정정상관성(r ＝0.999,P ＝0.027).자행합성적Pep12-USPIO 재실온하장시간보지은정적효체상태,수화직경위(86.60 ±1.48) nm.Pep12-USPIO 세포독성교저,철농도저우25 μg/ml 시,ΔR2 치화ΔR2*치여철농도정현량호적선성정비관계(△R2:R2 ＝0.996;△R2*:R2 ＝0.977).보로사람염색증실Pep12-USPIO 능구여3충악성종류세포실현파향결합,자공진성상증실Pep12-USPIO 능구조성종류세포현액자공진T2/T2*치강저(P ＜0.01),병차ΔR2/ΔR2*치여종류세포CXCR4 표체수평정현저적정상관(ΔR2:r ＝0.997,P ＝0.050;ΔR2*:r ＝1.000,P ＝0.019).결론 Pep12-USPIO 물이성질은정,세포독성교저,능구여불동악성종류세포주상적CXCR4 특이성결합병실현자공진T2/T2*신호적감저,병차자공진신호적변화여세포주CXCR4 적표체량정정상관.
