中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2013年
2期
240-247
,共8页
曹亦菲%谭晓华%黄仙红%何平%连福治%邓卢翠%杨磊
曹亦菲%譚曉華%黃仙紅%何平%連福治%鄧盧翠%楊磊
조역비%담효화%황선홍%하평%련복치%산로취%양뢰
水通道蛋白9%亚砷酸盐类%砷中毒
水通道蛋白9%亞砷痠鹽類%砷中毒
수통도단백9%아신산염류%신중독
目的 探讨人脐静脉内皮细胞株ECV-304和抗砷性ECV-304(AsRE)细胞株中水通道蛋白AQP9的表达及其磷酸化水平以及其对亚砷酸钠(NaAsO2)耐受性之间的关系.方法 采用CCK8法测定NaAsO2 2.5~40 μmol·L-1作用24 h对ECV-304和AsRE细胞株的毒性.NaAsO2 2.5~20 μmol·L-1处理ECV-304和AsRE细胞株2 h,实时定量PCR法测定AQP9 mRNA表达水平,Western印迹法检测AQP9和p38蛋白表达水平;免疫印迹法检测AQP9蛋白磷酸化水平;电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)法测定细胞内砷含量.结果 NaAsO2在AsRE和ECV-304细胞的IC50分别为12.59和4.06 μmol·L-1.在NaAsO2同浓度下,AsRE细胞内砷摄入量均低于ECV-304细胞(P<0.05).NaAsO2处理ECV-304和AsRE细胞后,AQP9 mRNA表达水平均有所下调,但在AsRE细胞中的下调幅度显著高于ECV-304细胞(P＜0.05);AQP9蛋白水平在AsRE细胞呈浓度增加而下降,而ECV-304细胞中则无明显变化;ECV-304细胞中AQP9磷酸化水平随浓度有所上升,AsRE细胞中AQP9磷酸化水平则一直维持在更高的表达水平.NaAsO2处理后,p38蛋白及其磷酸化水平在两个细胞株间无明显变化.结论 AsRE细胞中AQP9的磷酸化水平与砷耐受性有明显相关性,其可能机制是AQP9通过影响细胞对砷的摄入影响砷的耐受性.
目的 探討人臍靜脈內皮細胞株ECV-304和抗砷性ECV-304(AsRE)細胞株中水通道蛋白AQP9的錶達及其燐痠化水平以及其對亞砷痠鈉(NaAsO2)耐受性之間的關繫.方法 採用CCK8法測定NaAsO2 2.5~40 μmol·L-1作用24 h對ECV-304和AsRE細胞株的毒性.NaAsO2 2.5~20 μmol·L-1處理ECV-304和AsRE細胞株2 h,實時定量PCR法測定AQP9 mRNA錶達水平,Western印跡法檢測AQP9和p38蛋白錶達水平;免疫印跡法檢測AQP9蛋白燐痠化水平;電感耦閤等離子體質譜儀(ICP-MS)法測定細胞內砷含量.結果 NaAsO2在AsRE和ECV-304細胞的IC50分彆為12.59和4.06 μmol·L-1.在NaAsO2同濃度下,AsRE細胞內砷攝入量均低于ECV-304細胞(P<0.05).NaAsO2處理ECV-304和AsRE細胞後,AQP9 mRNA錶達水平均有所下調,但在AsRE細胞中的下調幅度顯著高于ECV-304細胞(P＜0.05);AQP9蛋白水平在AsRE細胞呈濃度增加而下降,而ECV-304細胞中則無明顯變化;ECV-304細胞中AQP9燐痠化水平隨濃度有所上升,AsRE細胞中AQP9燐痠化水平則一直維持在更高的錶達水平.NaAsO2處理後,p38蛋白及其燐痠化水平在兩箇細胞株間無明顯變化.結論 AsRE細胞中AQP9的燐痠化水平與砷耐受性有明顯相關性,其可能機製是AQP9通過影響細胞對砷的攝入影響砷的耐受性.
목적 탐토인제정맥내피세포주ECV-304화항신성ECV-304(AsRE)세포주중수통도단백AQP9적표체급기린산화수평이급기대아신산납(NaAsO2)내수성지간적관계.방법 채용CCK8법측정NaAsO2 2.5~40 μmol·L-1작용24 h대ECV-304화AsRE세포주적독성.NaAsO2 2.5~20 μmol·L-1처리ECV-304화AsRE세포주2 h,실시정량PCR법측정AQP9 mRNA표체수평,Western인적법검측AQP9화p38단백표체수평;면역인적법검측AQP9단백린산화수평;전감우합등리자체질보의(ICP-MS)법측정세포내신함량.결과 NaAsO2재AsRE화ECV-304세포적IC50분별위12.59화4.06 μmol·L-1.재NaAsO2동농도하,AsRE세포내신섭입량균저우ECV-304세포(P<0.05).NaAsO2처리ECV-304화AsRE세포후,AQP9 mRNA표체수평균유소하조,단재AsRE세포중적하조폭도현저고우ECV-304세포(P＜0.05);AQP9단백수평재AsRE세포정농도증가이하강,이ECV-304세포중칙무명현변화;ECV-304세포중AQP9린산화수평수농도유소상승,AsRE세포중AQP9린산화수평칙일직유지재경고적표체수평.NaAsO2처리후,p38단백급기린산화수평재량개세포주간무명현변화.결론 AsRE세포중AQP9적린산화수평여신내수성유명현상관성,기가능궤제시AQP9통과영향세포대신적섭입영향신적내수성.
