中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2013年
2期
150-155
,共6页
屈文慧%郁盛雪%隋海娟%金迎新%金向楠%金英
屈文慧%鬱盛雪%隋海娟%金迎新%金嚮楠%金英
굴문혜%욱성설%수해연%금영신%금향남%금영
阿托伐他汀%皮质神经元%突起生长%信号转导通路%磷酸酰肌醇-3激酶%蛋白激酶B%哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
阿託伐他汀%皮質神經元%突起生長%信號轉導通路%燐痠酰肌醇-3激酶%蛋白激酶B%哺乳動物雷帕黴素靶蛋白
아탁벌타정%피질신경원%돌기생장%신호전도통로%린산선기순-3격매%단백격매B%포유동물뢰파매소파단백
目的 探讨阿托伐他汀(Ato)对体外培养大鼠皮质神经元突起生长促进作用的信号转导机制.方法 取培养7 d大脑皮质神经元,分为Ato 10 μmol·L-1作用48 h组和阻断剂+Ato组,先分别加入阻断剂PD98059 50 μmol·L-1、LY294002 30 μmol·L-1、曲西立滨(TCBN)2.5 μmol·L-1和西罗莫司(雷帕霉素,Rapa) 100 nmol·L-1作用1 h,再加入Ato共同作用48 h.应用倒置相差显微镜观察神经元突起生长状况;Western 印迹法检测磷酸化的磷酸肌醇依赖激酶1(PDK1)、磷酸化蛋白激酶B(Akt)、磷酸化西罗莫司靶蛋白(mTOR)、磷酸化的核糖体S6激酶(p70S6K)和磷酸化的真核翻译起始因子4E结合蛋白 1(p-4E-BP1)的表达.结果 形态学观察结果显示,Ato 10 μmol·L-1组可明显促进突起生长,表现为突起总长度增加、一级突起数目增多、末端分支数增多及胞体面积增大.PD98059,LY294002,TCBN和Rapa均可阻断Ato对神经元突起生长的促进作用.Western印迹结果显示,Ato 10 μmol·L-1可显著上调p-PDK1,p-Akt(Ser473),p-mTOR,p-p70S6K和p-4E-BP1蛋白表达水平(P<0.01).LY294002可显著阻断Ato引起的p-PDK1,p-Akt(Ser473) 蛋白表达水平增加(P<0.01).TCBN 可显著阻断Ato引起的p-mTOR蛋白表达水平增加(P<0.01).Rapa可明显阻断Ato引起的p-p70S6K和p-4E-BP1蛋白表达水平增加(P<0.01).结论 Ato对体外培养皮质神经元突起发育的促进作用可能与激动MEK/ERK信号转导通路有一定的关系,主要可能与通过激活PI3K/Akt/mTOR信号转导通路有关.
目的 探討阿託伐他汀(Ato)對體外培養大鼠皮質神經元突起生長促進作用的信號轉導機製.方法 取培養7 d大腦皮質神經元,分為Ato 10 μmol·L-1作用48 h組和阻斷劑+Ato組,先分彆加入阻斷劑PD98059 50 μmol·L-1、LY294002 30 μmol·L-1、麯西立濱(TCBN)2.5 μmol·L-1和西囉莫司(雷帕黴素,Rapa) 100 nmol·L-1作用1 h,再加入Ato共同作用48 h.應用倒置相差顯微鏡觀察神經元突起生長狀況;Western 印跡法檢測燐痠化的燐痠肌醇依賴激酶1(PDK1)、燐痠化蛋白激酶B(Akt)、燐痠化西囉莫司靶蛋白(mTOR)、燐痠化的覈糖體S6激酶(p70S6K)和燐痠化的真覈翻譯起始因子4E結閤蛋白 1(p-4E-BP1)的錶達.結果 形態學觀察結果顯示,Ato 10 μmol·L-1組可明顯促進突起生長,錶現為突起總長度增加、一級突起數目增多、末耑分支數增多及胞體麵積增大.PD98059,LY294002,TCBN和Rapa均可阻斷Ato對神經元突起生長的促進作用.Western印跡結果顯示,Ato 10 μmol·L-1可顯著上調p-PDK1,p-Akt(Ser473),p-mTOR,p-p70S6K和p-4E-BP1蛋白錶達水平(P<0.01).LY294002可顯著阻斷Ato引起的p-PDK1,p-Akt(Ser473) 蛋白錶達水平增加(P<0.01).TCBN 可顯著阻斷Ato引起的p-mTOR蛋白錶達水平增加(P<0.01).Rapa可明顯阻斷Ato引起的p-p70S6K和p-4E-BP1蛋白錶達水平增加(P<0.01).結論 Ato對體外培養皮質神經元突起髮育的促進作用可能與激動MEK/ERK信號轉導通路有一定的關繫,主要可能與通過激活PI3K/Akt/mTOR信號轉導通路有關.
목적 탐토아탁벌타정(Ato)대체외배양대서피질신경원돌기생장촉진작용적신호전도궤제.방법 취배양7 d대뇌피질신경원,분위Ato 10 μmol·L-1작용48 h조화조단제+Ato조,선분별가입조단제PD98059 50 μmol·L-1、LY294002 30 μmol·L-1、곡서립빈(TCBN)2.5 μmol·L-1화서라막사(뢰파매소,Rapa) 100 nmol·L-1작용1 h,재가입Ato공동작용48 h.응용도치상차현미경관찰신경원돌기생장상황;Western 인적법검측린산화적린산기순의뢰격매1(PDK1)、린산화단백격매B(Akt)、린산화서라막사파단백(mTOR)、린산화적핵당체S6격매(p70S6K)화린산화적진핵번역기시인자4E결합단백 1(p-4E-BP1)적표체.결과 형태학관찰결과현시,Ato 10 μmol·L-1조가명현촉진돌기생장,표현위돌기총장도증가、일급돌기수목증다、말단분지수증다급포체면적증대.PD98059,LY294002,TCBN화Rapa균가조단Ato대신경원돌기생장적촉진작용.Western인적결과현시,Ato 10 μmol·L-1가현저상조p-PDK1,p-Akt(Ser473),p-mTOR,p-p70S6K화p-4E-BP1단백표체수평(P<0.01).LY294002가현저조단Ato인기적p-PDK1,p-Akt(Ser473) 단백표체수평증가(P<0.01).TCBN 가현저조단Ato인기적p-mTOR단백표체수평증가(P<0.01).Rapa가명현조단Ato인기적p-p70S6K화p-4E-BP1단백표체수평증가(P<0.01).결론 Ato대체외배양피질신경원돌기발육적촉진작용가능여격동MEK/ERK신호전도통로유일정적관계,주요가능여통과격활PI3K/Akt/mTOR신호전도통로유관.
