广西医科大学学报
廣西醫科大學學報
엄서의과대학학보
JOURNAL OF GUANGXI MEDICAL UNIVERSITY
2013年
3期
348-349
,共2页
免疫印迹法%蛋白质%蛋白浓度%浓度范围
免疫印跡法%蛋白質%蛋白濃度%濃度範圍
면역인적법%단백질%단백농도%농도범위
目的:研究Western blot方法中上样总蛋白量的不同对实验结果的影响.方法:收取正常成年人血清标本,测总蛋白浓度,然后分别以原血清,稀释2倍、5倍、10倍以及20倍血清等体积上样,以6%SDS-PAGE凝胶分离,拍照.结果:当上样量大于100 μg时,电泳后血清条带模糊不清,无法找出目的条带进行后续步骤的操作分析.当上样量在20~100 μg时,电泳后不同分子量的血清条带区分明显且边界清楚,有利于后续分析步骤的进行.当上样量在10 μg及10 μg以下时,电泳所得血清蛋白条带颜色较淡,提示总蛋白量不足,影响后续分析的灵敏度.结论:Western blot总蛋白上样量的不同直接关系到电泳后不同分子量目的条带的清晰程度,20~100 μg的血清总蛋白上样量可以作为Western blot上样量的参考范围.
目的:研究Western blot方法中上樣總蛋白量的不同對實驗結果的影響.方法:收取正常成年人血清標本,測總蛋白濃度,然後分彆以原血清,稀釋2倍、5倍、10倍以及20倍血清等體積上樣,以6%SDS-PAGE凝膠分離,拍照.結果:噹上樣量大于100 μg時,電泳後血清條帶模糊不清,無法找齣目的條帶進行後續步驟的操作分析.噹上樣量在20~100 μg時,電泳後不同分子量的血清條帶區分明顯且邊界清楚,有利于後續分析步驟的進行.噹上樣量在10 μg及10 μg以下時,電泳所得血清蛋白條帶顏色較淡,提示總蛋白量不足,影響後續分析的靈敏度.結論:Western blot總蛋白上樣量的不同直接關繫到電泳後不同分子量目的條帶的清晰程度,20~100 μg的血清總蛋白上樣量可以作為Western blot上樣量的參攷範圍.
목적:연구Western blot방법중상양총단백량적불동대실험결과적영향.방법:수취정상성년인혈청표본,측총단백농도,연후분별이원혈청,희석2배、5배、10배이급20배혈청등체적상양,이6%SDS-PAGE응효분리,박조.결과:당상양량대우100 μg시,전영후혈청조대모호불청,무법조출목적조대진행후속보취적조작분석.당상양량재20~100 μg시,전영후불동분자량적혈청조대구분명현차변계청초,유리우후속분석보취적진행.당상양량재10 μg급10 μg이하시,전영소득혈청단백조대안색교담,제시총단백량불족,영향후속분석적령민도.결론:Western blot총단백상양량적불동직접관계도전영후불동분자량목적조대적청석정도,20~100 μg적혈청총단백상양량가이작위Western blot상양량적삼고범위.
